造血幹細胞の増殖・分化制御におけるZFATとGemininの分子的クロストーク

ZFAT和Geminin分子串扰控制造血干细胞增殖和分化

• 批准号: 19K08828
• 负责人: 安永 晋一郎
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Fukuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K08828/
• 关键词: 造血幹細胞; 自己複製; 分化; ZFAT; Geminin

本研究は、造血発生や維持において必須であるZFATによる造血幹細胞の活性制御における分子機構を解明するとともに、ZFATシステムと造血幹細胞の活性支持の中核因子であるGemininシステムとのクロストークを解明することにより、生体外での造血幹細胞の増幅・維持の技術開発へ向けた分子基盤の確立を目指すものである。ZFATは、自己免疫性甲状腺疾患感受性遺伝子として同定された転写関連因子であり、T細胞のホメオスターシス維持や造血発生における赤芽球分化において必須である。ZFATは造血幹細胞にも発現を認めるが、造血幹細胞の増殖と分化の双面における活性制御における役割は未だ明らかではない。一方で申請者は、DNA複製ライセンス化制御による細胞増殖制御因子であり、かつクロマチンリモデリングによる幹細胞未分化性維持因子であるGemininのポリコーム複合体１やHoxタンパク質によるユビキチン化を介したタンパク質代謝が、造血幹細胞の活性を支持していることを明らかにしてきた。研究初年度は、静止期にある造血幹細胞にも目的遺伝子を導入でき、サイレンシングが起こりにくいSBI社のレンチウイルスベクター系を用いて、ZFAT強制発現系やDOX誘導型ZFATノックダウン系を作成した。また、膜透過型配列融合型ZFATリコンビナントタンパク質導入系を作成した。研究２年目は、ZFATとGemininのクロストークが、直接の結合によるものではないことがわかってきたため、アダプタータンパク質の同定のため、yeast-two-hybrid法にてZFATの結合タンパク質を探索した。既にGemininとの結合が報告されているタンパク質のほか、翻訳関連タンパク質などが同定されてきている。研究３年目および４年目は、同定されたアダプタータンパク質の分子生物学的解析を進めた。また本学でのマウス実験系の立ち上げに精力を注いだ。

This study is aimed at clarifying the molecular mechanisms necessary for hematopoietic development and maintenance, and at establishing the molecular basis for the development and maintenance of hematopoietic stem cells. ZFAT is an immune thyroid disease susceptible gene that is essential for T cell differentiation and hematopoietic development. ZFAT is responsible for hematopoietic stem cell development, proliferation and differentiation of hematopoietic stem cells, and active control. In one case, the applicant is interested in the regulation of DNA replication, the regulation of cell proliferation, the maintenance of stem cell undifferentiation, and the support of Geminin complex 1 and Hox in the regulation of DNA replication, the regulation of stem cell metabolism, and the activity of hematopoietic stem cells. At the beginning of the study, the target gene was introduced into hematopoietic stem cells during the quiescent period, and the ZFAT stress development line and DOX inducible ZFAT stress development line were established. The membrane permeable alignment fusion type ZFAT is prepared. 2 years of research, ZFAT and Geminin's combination, direct combination, yeast-two-hybrid method, ZFAT's combination and quality exploration Since the combination of Geminin and Geminin has been reported, the quality of the data and the quality of the data related to the data have been determined. The molecular biological analysis of the three and four years of research has been carried out simultaneously. This is the first time I've ever been to a school.

项目成果

MolecularLow-dose-rate irradiation preferentially affects hematopoietic stem cell activity.

分子低剂量率照射优先影响造血干细胞活性。

• 发表时间: 2019
• 作者: Ohno Y.;Suzuki-Takedachi K.;Guo Y.;Kanno M.;Shirasu N.;Yasunaga S.;Ohtsubo M. ; Takihara Y.
• 通讯作者: Takihara Y.

Low dose-rate irradiation preferentially affects the stemness of hematopoietic cells.

低剂量率照射优先影响造血细胞的干性。

• 发表时间: 2019
• 作者: Ohno Y.;Suzuki-Takedachi K.;Guo Y.;Kanno M.;Shirasu N.;Ohtsubo M.;Yasunaga S.,Takihara Y.
• 通讯作者: Yasunaga S.,Takihara Y.

Analysis of the molecular response for low dose-rate irradiation in the hematopoietic stem cells.

造血干细胞低剂量率照射的分子反应分析。

• 发表时间: 2019
• 作者: Suzuki-Takedachi K.;Ohno Y.;Santo M.;Guo Y.;Kanno M.;Shirasu N.;Ohtsubo M.;Yasunaga S.;Takihara Y.
• 通讯作者: Takihara Y.

Diagnostic predictability of miR-4535 and miR-1915-5p expression in amniotic fluid for foetal morbidity of infection.

羊水中 miR-4535 和 miR-1915-5p 表达对胎儿感染发病率的诊断预测。

• DOI: 10.1016/j.placenta.2021.08.059
• 发表时间: 2021
• 期刊: Placenta.
• 作者: Yoshikawa K;Kiyoshima C;Hirakawa T;Urushiyama D;Fukagawa S;Izuchi D;Sanui A;Kurakazu M;Miyata K;Nomiyama M;Setoue T;Nagamitsu S;Nabeshima K;Hata K;Yasunaga S;Miyamoto S.
• 通讯作者: Miyamoto S.

がん超音波力学療法における超音波感受性物質内封ナノリポソームの取り込みと分布のサイズの違いによる比較

不同尺寸封装超声敏感物质的纳米脂质体在肿瘤超声机械治疗中的摄取和分布比较

• 发表时间: 2019
• 作者: 芝口浩智;白須直人;安永晋一郎
• 通讯作者: 安永晋一郎