散発性アルツハイマー病解明に向けた脳におけるアポE含有リポタンパク代謝経路の解析

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アポＥ4は散発性アルツハイマー病の主要な危険因子であるが、アルツハイマー病発症における役割についてはほとんど明らかにされていない。脳内におけるアポEはコレステロールなどの脂質と複合体を形成し、いわゆるアポE含有リポタンパク（アポE-nHDL）として存在し、アポEを認識する受容体を介して神経細胞に取り込まれることでグリア細胞からコレステロールの供給を受けていると考えられている。我々は、生体の脳内に近い形の糖鎖修飾を受けたヒト・アポE及び糖鎖修飾を受けないアポE変異体の発現系を確立し、これらを大量に得る事に成功した。さらに、In vitroにおいてこれらアポEをアポE-nHDLへと効率よく変換し、これを多量に得る方法を確立した。精製アポE-nHDLを様々な神経損傷モデルのマウス脳室内に注入し、その動態を解析したが、in vivoでの神経細胞へのアポE-nHDLの取込みは観察されなかった。一方、タウ蛋白は線維化タウ蛋白シードと共に家族性タウオパチー変異（hTau P301L）をもつタウ蛋白を神経由来の培養細胞（Neuro2aやSH-SY5Y細胞）などで発現するとタウ凝集体を細胞内に形成することが知られている。そこで家族性タウオパチー変異タウ蛋白を線維化タウ蛋白のシードと共に神経由来の培養細胞に発現させ、細胞内におけるタウ蛋白のリン酸化状態を観察した。アポE及びアポE-nHDLを同時に取り込ませた際のタウ蛋白の変化（線維化やリン酸化状態）を観察したが、アポE-nHDLを取り込んだ細胞でのタウ凝集体やタウ蛋白のリン酸化状態に変化は見られなかった。