脳におけるリポタンパク受容体の機能解析

大脑中脂蛋白受体的功能分析

• 批准号: 15016012
• 负责人: 藤野 貴広
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15016012/
• 关键词: アルツハイマー; リポタンパクレセプター; アポE; ノックアウトマウス

リポタンパク受容体のリガンドであるアポEは古くからアルツハイマー病発症と密接に係わっていることが知られ、アポEの3つあるアイソフォームの一つであるアポE4はアルツハイマー病の危険因子として知られている。しかし、脳内における機能は殆ど解っていない。本研究は脳におけるリポタンパク受容体の機能解析を通して、脳神経系におけるアポEの役割やアルツハイマー病との関連を明らかにすることを目的としている。アポEの脳内における機能を解析する目的で、アポE/VLDLR/ApoER2を欠損するトリプルノックアウト(TKO)マウス又はLDLR/VLDLR/ApoER2を欠損するトリプルノックアウト2(TKO2)マウスを作製した。TKO及びTKO2マウスではDKOマウス(VLDLR/ApoER2)に比べ、明らかに海馬の層構造形成異常が亢進していた。DKOマウスの約20%は生後3ヶ月以上生存するが、TKO及びTKO2ではほぼ4週間以内に死亡する。これらマウスの直腸温の解析から、TKO及びTKO2マウスに見られる低生存率は著しい体温の低下によるものであることが示唆された。TKOやTKO2マウスでは他の遺伝型を持つマウスと比較して著しく高い血中コレステロール値を示したが、血中リポタンパクの解析から、これらのマウスに見られる高コレステロール血漿は脳形成の異常によるものではないことが示された。VLDLR(+/-)/ApoER2(-/-)マウスでは海馬CA1領域及びCA3領域のリボン部分の錐体細胞層が2層に分離しているが、アポEがさらに欠損する(ApoE(-/-)/VLDLR(+/-)/ApoER2(-/-))ことで錐体細胞層が1層に回復した。一方小脳や大脳皮質においては、アポEの有無による違いは全く見出せなかった。これら結果は、アポEがCA1領域及びCA3領域の錐体細胞に局在するVLDLRに特異的に結合していることを示した。また、LDLR/ApoER2マウスの解析から、LDLRはVLDLRやApoER2に比べ弱いながらも大脳皮質と海馬に於いてreelin受容体としても機能しているが、アポEに対する受容体としての機能は見出せなかった。一方、リポタンパク受容体を欠損した海馬ニューロンにおける血清β-VLDLの取り込みは、VLDLR欠損ニューロンではコントロールと比較して変化はなく、むしろLDLR欠損ニューロンで著しく減弱していた。現在、ヒト・ApoE2、E3又はE4のcDNAを組み込んだアデノウイルスを作成し、これらをApoEノックアウトマウスより調製したアストロサイト初代培養系で発現させ、この培養上清から調製したApoE-HDLの神経細胞への取り込みや神経細胞に対する毒性を検討している。

The receptor is isolated from the receptor and the disease is closely connected to the receptor. The receptor is isolated from the receptor and the disease is closely connected to the receptor. The function of "inside" and "inside" is to solve the problem. This study aims to clarify the functional analysis of the receptor and the relationship between the receptor and the receptor. For the purpose of analyzing the function in the field of APE, APE/VLDLR/ApoER2 is under loss, and APE/VLDLR/ApoER2 is under loss. TKO and TKO2 About 20% of DKO and TKO live for more than 3 months, while TKO and TKO2 die within 4 weeks. Low survival rate due to rectal temperature analysis, TKO and TKO TKO2 is the highest blood concentration in the blood, and the highest blood concentration in the blood is the highest blood concentration. VLDLR(+/-)/ApoER2 (-/-) is divided into two layers of pyramidal cell layers in CA1 and CA3 regions of hippocampus, and the pyramidal cell layer is divided into two layers. A small and large cortex, a large cortex, a small cortex, a large cortex, a large cortex, The results showed that the VLDLR was specific for CA1 and CA3 pyramidal cells. LDLR/ApoER2 receptor analysis, LDLR/ApoER2 receptor analysis The serum β-VLDL level was decreased by the decrease of VLDLR level. Now, ApoE2, E3 and ApoE4 cDNA group were constructed, ApoE2, E3 and ApoE4 cDNA group were modulated by ApoE2, E3 and ApoE4 cDNA group.

项目成果

Takahashi S.et al.: "The very low-density lipoprotein (VLDL) receptor-a peripheral lipoprotein receptor for remnant lipoproteins into fatty acid active tissues-."Mol.Cell.Biochem.. 248. 121-127 (2003)

Takahashi S.et al.：“极低密度脂蛋白 (VLDL) 受体 - 将残余脂蛋白转移到脂肪酸活性组织中的外周脂蛋白受体 -”Mol.Cell.Biochem.. 248. 121-127 (2003)

Yamamoto J.et al.: "A kruppel-like factor KLF 15 mediates fasting-Induced transcriptional activation of mitochondrial acetyl-CoA synthetase gene, AceCS2"J.Biol.Chem.. (in press). (2004)

Yamamoto J.等人：“Kruppel 样因子 KLF 15 介导禁食诱导的线粒体乙酰辅酶 A 合成酶基因 AceCS2 转录激活”J.Biol.Chem..（出版中）。

Fujino T.et al.: "Sources ofacetyl-CoA : acetyl-CoA synthetasel and 2."Curr.Med.Chem.Imun., Endoc. & Metab.Agents. 3. 207-210 (2003)

Fujino T.等人：“乙酰辅酶A的来源：乙酰辅酶A合成酶和2”。Curr.Med.Chem.Imun.，Endoc。

Magoori K.et al.: "Severe hypercholesterolemia, impaired fat tolerance and advanced atherosclerosis in mice lacking both LDL receptor-related protein 5(LRP5) and apolipoprotein E"J.BioL.Chem.. 278. 11331-11338 (2003)

Magoori K.等人：“缺乏 LDL 受体相关蛋白 5 (LRP5) 和载脂蛋白 E 的小鼠中的严重高胆固醇血症、脂肪耐受性受损和晚期动脉粥样硬化”J.BioL.Chem.. 278. 11331-11338 (2003)