アラキドン酸活性化酵素ノックアウトマウスの作製と解析

花生四烯酸激活酶敲除小鼠的产生与分析

• 批准号: 13760092
• 负责人: 藤野 貴広
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13760092/
• 关键词: 脂肪酸活性化酵素; アラキドン酸; プロスタグランジン; ノックアウトマウス; プロスタグラジン

マウスACS4遺伝子の一部を用いてターゲティングベクターを構築し、ACS4を欠損するES細胞を得た。このACS4欠損細胞を用いてキメラマウスを作製し、さらにF1雌ヘテロ接合体を得た。このF1雌ヘテロ接合体は形態、成長及び行動は正常であったが、ヘテロ接合体からF2世代への変異アレルの伝達に異常が認められた。すなわち、キメラマウスとF1雌ヘテロ接合体を交配して得られたF2世代の遺伝型のほとんどは野生型で、ヘテロ接合体は僅か、ヘミ及びホモ接合体は全く得られなかった。また、出産個体数も通常の約半分に減少していた。すなわち、ACS4は雌の生殖機能に重要な役割を果たしていることが強く示唆された。また、雌ヘテロ接合体の組織学的解析では、子宮の肥大と子宮内における大きな空胞が観察され、雌ヘテロ接合体の子宮内のプロスタグランジン濃度を測定した所、正常マウスと比較して著しく高い値を示した。これらの結果はACS4がプロスタグランジン生成の調節を通して、子宮の発達に重要な役割を果たしている事を示唆した。一方、HCG(繊毛性性腺刺激ホルモン)やPMSG(妊馬血清性性腺刺激ホルモン)などの性腺刺激ホルモンを投与したF1雌ヘテロ接合体とキメラマウスを交配させると希に雄ヘミ接合体、すなわちACS4欠損(ACS4KO)マウスを得られることが明らかとなった。このACS4KOマウスは発生及び形態的に正常で、生殖能力にも異常は見いだせなかった。ACS4KO雄マウスと野生型雌マウスとの交配ではメンデル則に従った遺伝型を持つマウスを得られたが、雌ヘテロ接合体との交配ではほとんどが野生型で、ヘテロ接合体は僅か、ヘミ及びホモ接合体は全く得られなかった。この結果は、キメラマウスとF1雌ヘテロ接合体を交配した場合と同様の結果であることから、雌ヘテロ接合体の子宮内においてヘテロ又はホモ接合体の胎児のみが選択的に発達異常を起こしていることが示された。また、ACS4の欠損は雄には何の影響も与えないことが明らかとなった。

A part of the MAUKES ACS4 gene was constructed using Iteta-getatengkata-and ACS4 was obtained from ES cells without damage. The ACS4 defective cells were used to control the F1 female zygote. The F1 female conjugant has a normal morphology, growth, and behavior. The F2 female conjugant has a different morphology and behavior. The F1 female conjugant was mated and the F2 generation was inherited from the wild type. The F1 female conjugant was mated and the F2 generation was inherited from the wild type. The number of units produced is usually reduced by about half. ACS4 is an important part of female reproductive function. Histological analysis of female zygotes: uterine hypertrophy, uterine cavity, uterine cavity The results showed that ACS4 had a significant effect on the regulation of uterine development. One side, HCG(Hair Gonad Stimulation) and PMSG(Pregnant Horse Serum Gonad Stimulation) are used for gonad stimulation. F1 female conjugants are used for mating. Male conjugants are used for ACS4 deficiency (ACS4KO). The ACS4KO has a normal reproduction and morphology, and an abnormal reproduction. ACS4KO male and wild type female mating, female and wild type mating, female and wild type mating. The results showed that the abnormal development of F1 female zygotes in utero was caused by the abnormal development of F1 female zygotes. What is the impact of ACS4?

项目成果

Minekura H. et al.: "Exon/Intron organization and transcription units of the human acyl-CoA synthetase 4 gene"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 286. 80-60 (2001)

Minekura H.等：“人酰基辅酶A合成酶4基因的外显子/内含子组织和转录单位”Biochem。

Cho Y-Y. et al.: "Abnormal uterus with polycysts, accumulation of uterine prostaglandins, and reduced fertility in mice heterozygous for acyl-CoA synthetase 4 deficiency"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 284. 993-997 (2001)

曹Y-Y。

Fujino T. et al.: "Sources ofacetyl-CoA : acetyl-CoA synthetasel and2"Curr. Med. Chem. -Imun., Endoc. &Metab. Agents. (in press). (2003)

Fujino T.等人：“乙酰辅酶A的来源：乙酰辅酶A合成酶和2”Curr。

Minekura H. et al.: "Genomic organizaion and transcription unit of the human acyl-CoA synthetase 3gene"Gene. 278. 185-195 (2001)

Minekura H.等人：“人类酰基辅酶A合成酶3基因的基因组组织和转录单位”基因。