Antikörper-basierte Quantifizierung spezifischer Zytostatika-DNA-Addukte in experimentellen Zellsystemen und in klinischem Probenmaterial

对实验细胞系统和临床样品材料中的特定细胞抑制药物-DNA 加合物进行基于抗体的定量

• 批准号: 38498505
• 负责人: Professor Dr. Michael Linscheid
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Zellbiologie (Tumorforschung)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2006-12-31 至 2014-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/38498505?language=en
• 关键词: Antik; rper; basierte; Quantifizierung; spezifischer

Ziel des gemeinsamen Projektes ist die qualitative und quantitative Erfassung von strukturell definierten Addukten alkylierender bzw. Platin-haltiger Zytostatika in der DNA von Modellsystemen, Einzelzellen und in Gewebeschnitten. Exemplarisch sollen im Rahmen des Antrags die klinisch eingesetzten Substanzen Cisplatin, Oxaliplatin, Melphalan und Chlorambucil untersucht werden. Dabei kommen für die Identifizierung und Quantifizierung der Hauptaddukte zum einen immunanalytische Messverfahren zum Einsatz, die auf Adduktspezifischen monoklonalen Antikörpern (MAK) basieren. Die Erkennungsspezifität der MAK wird dabei mit Hilfe von Hochleistungstrenntechniken und massenspektrometrischen Verfahren verifiziert. Zum anderen basiert die Quantifizierung des kompletten Spektrums der in vitro und in vivo gebildeten Zytostatikum-DNA-Addukte auf einer elementspezifischen Detektion des nukleotidgebundenen Platins mittels induktiv gekoppelter Plasma-Massenspektrometrie (ICP-MS) im Falle der platinhaltigen Zytostatika. Im Falle der alkylierenden Zytostatika (Melphalan, Chlorambucil) kann die Quantifizierung auf die Detektion des nukleotidgebundenen Phosphors oder alternativ durch eine zu entwickelnde spezifische Metallcodierung mittels HPLC-ICP-MS bzw. auf die Erfassung der spezifischen DNA-Addukte mit Hilfe der HPLC-ESI-MS gestützt werden.

这些共同的项目是对结构中所定义的加成烷基化合物进行定性和定量测定。DNA中的铂-半乳糖发酵稳定性，模型系统，Einzelzellen和Gewebeschnitten。顺铂、奥沙利铂、美法仑和苯丁酸氮芥韦尔登的临床应用实例。Dabei kommen für die Identifizierung und Quantifizierung der Hauptaddukte zum einen immunanalytische Messverfahren zum Einstein，die auf Adduktspezifischen monoklonalen Antikörpern（MAK）basieren. MAK的识别性能将由HALFE von HALTENSTUNGSTRENTHENTECHNIKEN和质谱测量Verfahren验证。本研究以体外和体内合成的Zytostatibilide-DNA-Addukte的复杂光谱定量为基础，采用工业化的等离子体质谱法（ICP-MS）检测铂类药物的核结合元素。在烷基化酶抑制剂（美法仑、苯丁酸氮芥）中，可以通过HPLC-ICP-MS方法进行定量检测或替代检测。用HPLC-ESI-MS韦尔登检测特异性DNA加标物。

项目成果

Structures of oxaliplatin-oligonucleotide adducts from DNA.

• DOI: 10.1002/jms.3080
• 发表时间: 2012-10
• 期刊: Journal of mass spectrometry : JMS
• 作者: S. Mowaka;Matthias Ziehe;D. Mohamed;U. Hochkirch;J. Thomale;M. Linscheid

LA-ICP-MS and nHPLC-ESI-LTQ-FT-MS/MS for the analysis of cisplatin–protein complexes separated by two dimensional gel electrophoresis in biological samples

• DOI: 10.1039/c2ja30016h
• 发表时间: 2012-08
• 期刊: Journal of Analytical Atomic Spectrometry
• 影响因子: 3.4
• 作者: E. Moreno-Gordaliza;D. Esteban-Fernández;Charlotte Giesen;Charlotte Giesen;K. Lehmann;A. Lázaro;A. Tejedor;C. Scheler;B. Cañas;N. Jakubowski;M. Linscheid;M. M. Gómez-Gómez-M.-M.-Gómez-Gómez-1399021175

Separation and characterization of oxaliplatin dinucleotides from DNA using HPLC-ESI ion trap mass spectrometry

• DOI: 10.1007/s00216-008-2311-6
• 发表时间: 2008-08
• 期刊: Analytical and Bioanalytical Chemistry
• 影响因子: 4.3
• 作者: S. Mowaka;M. Linscheid

On the complexity and dynamics of in vivo Cisplatin-DNA adduct formation using HPLC/ICP-MS.

• DOI: 10.1039/c2mt20128c
• 发表时间: 2012-10
• 期刊: Metallomics : integrated biometal science
• 作者: Matthias Ziehe;D. Esteban-Fernández;U. Hochkirch;J. Thomale;M. Linscheid

ERCC1 isoform expression and DNA repair in non-small-cell lung cancer.

• DOI: 10.1056/nejmoa1214271
• 发表时间: 2013-03-21
• 期刊: The New England journal of medicine
• 作者: Friboulet L;Olaussen KA;Pignon JP;Shepherd FA;Tsao MS;Graziano S;Kratzke R;Douillard JY;Seymour L;Pirker R;Filipits M;André F;Solary E;Ponsonnailles F;Robin A;Stoclin A;Dorvault N;Commo F;Adam J;Vanhecke E;Saulnier P;Thomale J;Le Chevalier T;Dunant A;Rousseau V;Le Teuff G;Brambilla E;Soria JC
• 通讯作者: Soria JC