イヌ組織球性肉腫に対するＡＩＭのアポトーシス促進機構の解明と治療への応用

これまでの研究によりマクロファージの分泌するタンパク質であるApoptosis Inhibitor of Macrophage(AIM)が組織球性肉腫細胞株に対してアポトーシス誘導作用があることが明らかとなった。そのため、本年度はそのアポトーシス誘導性が生体内においても存在するのかどうかについて検討することとした。まずは昨年度に作成したイヌAIM恒常発現細胞株をヌードマウスに移植し、生体内でのAIMの組織球性肉腫に与える影響について検討した。腫瘍サイズを2日おきに測定したところ、通常の組織球性肉腫細胞株と比較してAIMを恒常発現する細胞株では有意に増大速度が遅い結果が得られた。続いて、同じく昨年度作成した抗イヌAIM抗体を用い、組織球性肉腫の免疫組織化学を実施した。病理学的に組織球性肉腫と診断された症例のパラフィンブロックよりスライドを作成し、染色を実施した。すると、30%の症例はAIMの発現量が認められなかったが、40%の症例では強く発現が認められた。残り30%はまだらに染色された。AIMが陽性であった症例に関してAIMの機能異常が考えられたため、組織球性肉腫症例のAIMのDNA配列を同定した。組織球性肉腫症例では腫瘍部・正常部ともに同一のSNPが観察された。このSNPはアミノ酸置換を伴うものであり、AIM自体の機能や構造に変化をもたらす可能性が考えられた。つづいてこれを非組織球性肉腫罹患犬におけるSNPの発生頻度と比較したところ、組織球性肉腫症例では有意に高い頻度でSNPが認められることが明らかとなった。以上の結果より、SNPを持つ症例は組織球性肉腫に罹患しやすくなっている可能性、さらにSNPを保持するAIMが、AIMの既知の機能と別の機能を持っている可能性が示された。

これまでの研究によりマクロファージの分泌するタンパク質であるApoptosis Inhibitor of Macrophage(AIM)が組織球性肉腫細胞株に対してアポトーシス誘導作用があることが明らかとなった。そのため、本年度はそのアポトーシス誘導性が生体内においても存在するのかどうかについて検討することとした。まずは昨年度に作成したイヌAIM恒常発現細胞株をヌードマウスに移植し、生体内でのAIMの組織球性肉腫に与える影響について検討した。腫瘍サイズを2日おきに測定したところ、通常の組織球性肉腫細胞株と比較してAIMを恒常発現する細胞株では有意に増大速度が遅い結果が得られた。続いて、同じく昨年度作成した抗イヌAIM抗体を用い、組織球性肉腫の免疫組織化学を実施した。病理学的に組織球性肉腫と診断された症例のパラフィンブロックよりスライドを作成し、染色を実施した。すると、30%の症例はAIMの発現量が認められなかったが、40%の症例では強く発現が認められた。残り30%はまだらに染色された。AIMが陽性であった症例に関してAIMの機能異常が考えられたため、組織球性肉腫症例のAIMのDNA配列を同定した。組織球性肉腫症例では腫瘍部・正常部ともに同一のSNPが観察された。このSNPはアミノ酸置換を伴うものであり、AIM自体の機能や構造に変化をもたらす可能性が考えられた。つづいてこれを非組織球性肉腫罹患犬におけるSNPの発生頻度と比較したところ、組織球性肉腫症例では有意に高い頻度でSNPが認められることが明らかとなった。以上の結果より、SNPを持つ症例は組織球性肉腫に罹患しやすくなっている可能性、さらにSNPを保持するAIMが、AIMの既知の機能と別の機能を持っている可能性が示された。