two-dimensional construction of ECM-glycoconjugate chips using single molecule manipulation by glycosyltransferase attached with AFM tip

使用附有 AFM 尖端的糖基转移酶进行单分子操作来二维构建 ECM-糖缀合物芯片

• 批准号: 24655098
• 负责人: MORI Toshiaki
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24655098/
• 关键词: 1分子計測; 糖転移反応; AFM; フォースカーブ測定; 糖鎖チップ; グライコミクス; 糖転移酵素; SPM; コンドロイチン合成酵素

In order to construct ECM-glycoconjugate chips, we employed the single molecule manipulation methods . First, we examine the preparation of AFM tips modified with glycosyltransferase. As a result, we could prepare the enzyme tips. And then, we performed the force-distance measurements with the enzyme tip to the substrates on the mica surface. We examined the interaction between enzymes and the corresponding substrates under several conditions. We confirm the detection of the procedures for the enzymatic reaction. And we could control the movoment of the tip in the area with 50 nm width.

为了构建ECM-糖缀合物芯片，我们采用单分子操作方法。首先，我们研究了糖基转移酶修饰的AFM针尖的制备。因此，我们可以制备酶尖。然后，我们进行了力的距离测量与酶尖的基板上的云母表面。我们研究了在几种条件下酶和相应的底物之间的相互作用。我们确认检测酶促反应的程序。在50 nm宽的区域内可以控制针尖的运动。

项目成果

AFMを用いた脂質二分子膜中の膜タンパク質の動的挙動解析

使用 AFM 分析脂质双层膜中膜蛋白的动态行为

• 发表时间: 2014
• 作者: 田中利奈;森俊明
• 通讯作者: 森俊明

Binding Kinetics of Lectins to Sugar Surfaces on a Quartz-Crystal Microbalance

石英晶体微天平上凝集素与糖表面的结合动力学

• 期刊: Methods in Molecular Biology
• 作者: Toshiaki Mori;Megumi Asakura;and Yoshio Okahata;Yoshio Okahata and Toshiaki Mori
• 通讯作者: Yoshio Okahata and Toshiaki Mori

ベロ毒素修飾チップによるGb3Cer含有脂質膜のフォースマッピング観察

使用 Verotoxin 修饰芯片对含 Gb3Cer 的脂质膜进行力图观察

• 发表时间: 2013
• 作者: 森俊明;小泉翔平;岡畑恵雄
• 通讯作者: 岡畑恵雄

生体膜上のナノ糖鎖の生成に関する精密計測

生物膜上纳米聚糖产量的精确测量

• 发表时间: 2013
• 作者: 小林真也;森俊明;森 俊明;森俊明
• 通讯作者: 森俊明

Kinetics of iterative carbohydrate transfer to polysaccharide catalyzed by chondroitin polymerase on a highly sensitive flow-type 27 MHz quartz-crystal microbalance.

• DOI: 10.1002/chem.201200342
• 发表时间: 2012-06
• 期刊: Chemistry
• 作者: Toshiaki Mori;T. Kodera;Hiroshi Yoshimine;Y. Kakuta;N. Sugiura;K. Kimata;Y. Okahata