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Anlyses of enzymatic reaction about glycoconjugates using Atomic Force Microscopy in single molecule level

使用原子力显微镜在单分子水平上分析糖复合物的酶促反应

基本信息

批准号：
23350078
负责人：
MORI Toshiaki
金额：
$ 12.31万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011-04-01 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

Atomic force microscopy (AFM) can detect forces as intermolecular interaction forces by force-curve measurements. For example, when a ligand is immobilized on a chip, and a receptor is immobilized on a plate, we can measure single-molecular interaction forces between two molecules. The distribution of glycolipid microdomain in biomembrane is difficult to observe in nanometer scale. We measured a distribution of glycolipid Gb3Ceramide (Gb3Cer) in lipid bilayer by AFM force mapping measurement using Verotoxin modified tip.In this study, we have analyzed interaction forces between a verotoxin that is a substance responsible for o-157 and Gb3 sugar molecules on a cell surface. The rupture forces were obtained by changing loading rates and we can get an effective bond length which is an important parameter for an analysis of interaction mechanisms. We detected single-molecular interaction forces, and we discussed about the interaction mechanism in more detail by an analysis of the forces.

原子力显微镜（AFM）可以通过力曲线测量来检测分子间相互作用力。例如，当配体固定在芯片上，受体固定在平板上时，我们可以测量两个分子之间的单分子相互作用力。生物膜中糖脂微域的分布在纳米尺度上难以观察。利用Verotoxin修饰的探针，采用AFM力测法测定了脂质双分子层中糖脂Gb3Ceramide （Gb3Cer）的分布。在这项研究中，我们分析了在细胞表面负责o-157和Gb3糖分子的一种毒毒素之间的相互作用力。通过改变加载速率得到断裂力，得到有效键长，这是分析相互作用机理的重要参数。我们检测了单分子的相互作用力，并通过对作用力的分析，详细讨论了相互作用的机理。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

AFMを用いた脂質二分子膜中の膜タンパク質の動的挙動解析

使用 AFM 分析脂质双层膜中膜蛋白的动态行为

DOI：
发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
0
作者：
田中利奈;森俊明
通讯作者：
森俊明

Binding Kinetics of Lectins to Sugar Surfaces on a Quartz-Crystal Microbalance

石英晶体微天平上凝集素与糖表面的结合动力学

DOI：
发表时间：
期刊：
Methods in Molecular Biology
影响因子：
0
作者：
Toshiaki Mori;Megumi Asakura;and Yoshio Okahata;Yoshio Okahata and Toshiaki Mori
通讯作者：
Yoshio Okahata and Toshiaki Mori

ベロ毒素修飾チップによるGb3Cer含有脂質膜のフォースマッピング観察

使用 Verotoxin 修饰芯片对含 Gb3Cer 的脂质膜进行力图观察