Visualizing membrane contact site between the ER and Golgi to analyze the functional kinetics

可视化 ER 和高尔基体之间的膜接触位点以分析功能动力学

• 批准号: 25650034
• 负责人: MAEDA Yusuke
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-25650034/
• 关键词: 膜コンタクト部位; ゴルジ装置; コレステロール; スプリットタンパク質; 膜コンタクト(接触)部位; オルガネラ; 小胞非依存的輸送

As a first step to visualize speculated membrane contact sites (MCS) between intracellular organelles such as the endoplasmic reticulum and Golgi apparatus, I proved the presence of the sites where these organelles membranes are closely apposed by Proximity Ligation Assay. Next, I tried to establish a split-DHFR system for real-time monitoring of MCS in vivo. At present, fairly good results are obtained and it is expected in near future to achieve the original goal of visualizing MCS in vivo by increasing the sensitivities and to clarify the mechanisms by which the transport of cholesterol is regulated.

作为可视化细胞内细胞器（如内质网和高尔基体）之间推测的膜接触位点（MCS）的第一步，我通过近距离结联试验证明了这些细胞器膜紧密接触位点的存在。接下来，我尝试建立一个split-DHFR系统，用于体内MCS的实时监测。目前已经取得了较好的结果，有望在不久的将来通过提高灵敏度实现MCS在体内可视化的最初目标，并阐明胆固醇转运的调控机制。

项目成果

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ゴルジ装置の酸性環境による細胞内コレステロールの生合成・輸送の調節

高尔基体酸性环境对细胞内胆固醇生物合成和运输的调节

• 发表时间: 2013
• 作者: 前田裕輔;奥崎大介;木下タロウ
• 通讯作者: 木下タロウ

膜コンタクト部位の可視化および定量化による細胞内コレステロール輸送の調節機構の解明(仮タイトル)

通过膜接触位点的可视化和定量阐明细胞内胆固醇转运的调节机制（暂定标题）

• 发表时间: 2014
• 作者: 前田裕輔;奥崎大介;木下タロウ
• 通讯作者: 木下タロウ

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ゴルジ装置の酸性環境によるコレステロール代謝の調節機構の解明

阐明高尔基体酸性环境对胆固醇代谢的调节机制

• 发表时间: 2014
• 作者: 前田裕輔;奥崎大介;木下タロウ;前田裕輔
• 通讯作者: 前田裕輔