Die physiologische Bedeutung der oxLDL abhängigen LOX-1 Rezeptor Aktivierung in Granulosazellen verweist auf die Autophagie als neuer Form der Follikelatresie

颗粒细胞中 oxLDL 依赖性 LOX-1 受体激活的生理意义表明自噬是一种新形式的滤泡闭锁

• 批准号: 40199371
• 负责人: Professorin Dr. Katharina Spanel-Borowski
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Anatomie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2006-12-31 至 2011-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/40199371?language=en
• 关键词: Die; physiologische; Bedeutung; der; oxLDL

Wie wir kürzlich publiziert haben, exprimieren menschlichen Granulosazellen den LOX-1 (lectin-like oxLDL) Rezeptor. Seine Aktivierung durch oxLDL (oxidized low-density lipoprotein) führt zur Autophagie als alternativer Form des programmierten Zelltodes. Ziel dieses Projektes ist es, die Autophagie als neue, physiologische und von oxLDL gesteuerte Form der Follikelatresie vorzustellen. Dicke Frauen werden als experimentelles Modell für die Studie einer oxLDL abhängigen Autophagie in Granulosazellen gewählt, da bei Adipositas durch erhöhte Bildung hochreaktiver Sauerstoffradikale (ROS) oxidativer Stress auftritt und vermehrt LDL zu oxLDL oxydiert wird. Im Besonderen ist geplant, Follikelflüssigkeit und Granulosazellen präovulatorischer Follikel von adipösen Frauen ohne polyzystische Ovarien und von normalgewichtigen Frauen jeweils unter in vitro-Fertilisations- (IVF) Therapie zu untersuchen. Folgende Studien werden durchgeführt: (1) Die Konzentration von oxLDL sowie die Aktivität von antioxidativen Schlüsselenzymen wie Superoxid-Dismutase (SOD) und Glutathionperoxidase (GPx) werden in der Follikelflüssigkeit bestimmt. (2) In frisch gewonnenen Granulosazellen wird die Expressionsstärke des oxLDL abhängigen LOX-1 Rezeptors auf mRNA und Proteinebene untersucht. Zusätzlich werden Marker der Autophagie überprüft wie das ultrastrukturelle Auftreten von Autophagosomen und die Hochregulierung von Autophagie-abhängigen Proteinen (LC3, Beclin-1, Hsc 70 and 73, i.e. heat shock cognate protein 70 and 73, Cathepsin D) (3) In Langzeitkultur studieren wir den oxLDL abhängigen Zelltod in zwei phänotypisch unterschiedliche Granulosazellen unter der Annahme, dass es zur Autophagy nur in LOX-1 positiven, fibroblastenähnlichen, Zytokeratin-negativen Granulosazellen kommt. (4) Durch Zugabe spezifischer Inhibitoren/Aktivatoren wird gezeigt dass die LOX-1 Expressionsstärke mit der Aktivität von SOD und GPx in Zytokeratin-negativen Granulosazellen umgekehrt korreliert (5). Das verstärkte Vorkommen der Autophagie als neuer Form der Follikelatresie wird in Ovarien unreifer, genetisch dicker Mäuse (ob/ob Mäuse) im Vergleich zu Wildtyp-Tieren gezeigt. Mit dieser Studie beweisen wir, dass die Autophagie als physiologischer Prozess in präovulatorischen Follikeln auftritt und dass er bei adipösen Frauen erhöht ist. Ein Zusammenhang zwischen dem oxLDL-LOX-1 System und dem antioxidativen Status wird für die Autophagie von Granulosazellen demonstriert. Wir sagen voraus, dass die oxLDL abhängige Autophagie unser Verständnis der Atresie nicht nur für präovulatorische, sondern ebenso für antrale und präantrale Follikel revolutionieren wird.

正如我们所做的那样，实验室研究了LOX-1（凝集素样oxLDL）受体的颗粒。通过oxLDL（氧化低密度脂蛋白）激活细胞自噬是细胞程序的替代形式。这些研究表明，自噬是卵泡闭锁的新的、生理学的和oxLDL形成的形式。迪凯Frauen韦尔登（Frauen）用实验模型研究了氧化低密度脂蛋白（oxLDL）在脂肪颗粒中的自噬作用，即通过高浓度的ROS（sauerstoffradikale）氧化应激促进LDL氧化，并将LDL转化为oxLDL。In Besonderen ist geplant，Follikelflüssigkeit und Granulosazellen präovulatorischer Follikel von adipösen Frauen ohne polyzystische Ovarien und von normalgewichtigen Frauen jeweils unter in vitro-Fertilizations-（IVF）Therapie zu untersuchen.结果表明：（1）oxLDL浓度的变化可影响卵泡液中SOD和GPx等抗氧化酶的活性。(2)在新鲜的颗粒中，氧化低密度脂蛋白的表达会抑制LOX-1受体在mRNA和蛋白质上的表达。韦尔登（LC 3，Beclin-1，Hsc 70 and 73，即热休克同源蛋白70 and 73，组织蛋白酶D）（3）In Langzeitkultur studieren wir den oxLDL abhängigen Zelltod in zwei phänotypisch unterior edliche Granulosazellen unter der Annahme，dass es zur Autophagy努尔in LOX-1 positive，fibroblastenähnlichen，Zytokermin-negativen Granulosazellen kommt. (4)Zugabe的特异性抑制剂/激活剂可使酶角蛋白阴性颗粒中的LOX-1表达与SOD和GPx的激活作用一致（5）。自噬的前体细胞是卵泡闭锁的新形式，在未受精的卵巢中，自噬的前体细胞是由野生型动物的后代Mäuse（ob/ob Mäuse）遗传的。我们的研究表明，自噬是促排卵卵泡发育的生理过程，也是女性的最佳选择。oxLDL-LOX-1系统和抗氧化状态的改变将有助于证实粒细胞自噬。我们已经知道，在Atresie的研究中，oxLDL的自噬作用不仅仅是为了促进排卵，而是为了促进卵泡的发育。