マクロファージ活性化制御による肺線維症およびその急性増悪に対する治療の確立

点击翻译按钮获取中文摘要

7周齢の雄性Wistar ratにブレオマイシン（3mg/kg）を気管内投与、１週間後にLPS（0.15mg/kg）を気管内投与する。LPS投与48時間後に、麻酔下で採血し、血液ガス測定、肺胞マクロファージ採取、肺組織を遺伝子、タンパク発現用に液体窒素で凍結保存、組織学的評価用にホルマリン固定する。本モデルに新規化合物を投与し介入研究を行った。CXCL13mRNAの発現量はLPS気管内投与のみでは24時間後に正常群に比較し4倍に増加するが48時間後には低下する。一方、ブレオマイシンとLPSを気管内投与すると正常群に比較し8倍に上昇し、さらに24〜72時間後にかけて持続することが分かった。また、肺組織中のCCR5遺伝子とIL-10遺伝子の発現をDNA arrayで検証した。CCR5遺伝子とIL-10遺伝子の発現はブレオマイシンとLPS投与群で著明に上昇することが分かった。本モデルに試験化合物を投与し介入研究を行ったが、組織像、血液ガス、各種炎症メディエータに有意な変化は認められなかった。その理由として、試験化合物の投与期間が短く、有効に作用していない可能性が示唆された。そこで7週齢のWistar RatにBLM (3 mg/kg)を気管内投与し、線維化が確立した14日目から低容量のLPS(0.15mg/kg) を3日毎に3回気管内投与し、BLM投与から28日目に犠牲死させるモデルを作成した。BLM投与10日目より試験化合物を開始し、BLM投与から28日目に犠牲死させた(Figure 6)。BLMとLPSによる線維化は試験化合物投与により組織学的に有意に抑制された。さらにcollagen1A1 mRNAの発現もSACによる有意な抑制が認められた。そして、BAL中のマクロファージ数はBLMとLPS投与により増加するが、試験化合物投与により有意に低下することがわかった。