マクロファージ活性化制御による肺線維症およびその急性増悪に対する治療の確立

通过控制巨噬细胞活化建立肺纤维化及其急性加重的治疗方法

• 批准号: 21K16520
• 负责人: 宮本 光
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Osaka Metropolitan University (2022)Osaka City University (2021)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16520/
• 关键词: ブレオマイシン; LPS; マクロファージ; 肺線維症

7周齢の雄性Wistar ratにブレオマイシン（3mg/kg）を気管内投与、１週間後にLPS（0.15mg/kg）を気管内投与する。LPS投与48時間後に、麻酔下で採血し、血液ガス測定、肺胞マクロファージ採取、肺組織を遺伝子、タンパク発現用に液体窒素で凍結保存、組織学的評価用にホルマリン固定する。本モデルに新規化合物を投与し介入研究を行った。CXCL13mRNAの発現量はLPS気管内投与のみでは24時間後に正常群に比較し4倍に増加するが48時間後には低下する。一方、ブレオマイシンとLPSを気管内投与すると正常群に比較し8倍に上昇し、さらに24〜72時間後にかけて持続することが分かった。また、肺組織中のCCR5遺伝子とIL-10遺伝子の発現をDNA arrayで検証した。CCR5遺伝子とIL-10遺伝子の発現はブレオマイシンとLPS投与群で著明に上昇することが分かった。本モデルに試験化合物を投与し介入研究を行ったが、組織像、血液ガス、各種炎症メディエータに有意な変化は認められなかった。その理由として、試験化合物の投与期間が短く、有効に作用していない可能性が示唆された。そこで7週齢のWistar RatにBLM (3 mg/kg)を気管内投与し、線維化が確立した14日目から低容量のLPS(0.15mg/kg) を3日毎に3回気管内投与し、BLM投与から28日目に犠牲死させるモデルを作成した。BLM投与10日目より試験化合物を開始し、BLM投与から28日目に犠牲死させた(Figure 6)。BLMとLPSによる線維化は試験化合物投与により組織学的に有意に抑制された。さらにcollagen1A1 mRNAの発現もSACによる有意な抑制が認められた。そして、BAL中のマクロファージ数はBLMとLPS投与により増加するが、試験化合物投与により有意に低下することがわかった。

At 7 weeks, 齢 <s:1> <s:1> male Wistar ratにブレ にブレ にブレ シ シ シ シ (3mg/kg) を tube was administered, and after 1 week, にLPS (0.15mg/kg) を tube was administered to する. Cast with LPS after 48 time under に, hemp 酔 で blood し, blood ガ ス determination, lung cell マ ク ロ フ ァ ー ジ take, lung tissue を heritage 伝, タ ン パ ク 発 current に liquid smothering で freezing preservation, histological evaluation 価 with に ホ ル マ リ ン fixed す る. This モデ に に new regulation compound を is used in the <s:1> intervention study を and った. The <s:1> occurrence amount <e:1> of CXCL13mRNA by LPS injection was 4 times that of the に normal group に after <s:1> みで <e:1> 24 time, and after するが48 time, it was に <e:1> lower than する. Party, ブ レ オ マ イ シ ン と LPS を 気 tube cast with す る と normal group of 8 times に compare し に rise し, さ ら に 24 & # 12316; 72 hours later, に けて けて holds 続する とが とが points った った. Youdaoplaceholder0, 伝 offspring of <s:1> CCR5 and と offspring of IL-10 in lung tissue, をDNA arrayで検 syndrome た. Traces of traces of CCR5 伝 son と IL - 10 伝 son の 発 now は ブ レ オ マ イ シ ン と LPS cast and a rise in group of で zhao Ming に す る こ と が points か っ た. This モ デ ル に test compound を pitch line and し intervention study を っ た が, organizations like, blood ガ ス, various kinds of inflammation メ デ ィ エ ー タ に intentionally な variations change は recognize め ら れ な か っ た. そ の reason と し て, short during the test compound の cast with が く, unseen に role し て い な が い possibility in stopping さ れ た. そ こ で 7 weeks 齢 の Wistar Rat に BLM (3 mg/kg) を 気 tube pitch and し, line d が establish し た 14 orders か ら low volume の LPS (0.15 mg/kg) in their を 3 に 3 back 気 tube and し, BLM shots and か ら 28 eyes に bloods die さ せ る モ デ ル を made し た. On the 10th day of BLM injection, よ よ experimental compound を was used to start を, and on the 28th day of BLM injection, に death was sacrificed させた(Figure 6). The に intentional に inhibition された of によ <s:1> histology by BLMとLPSによる line dimensionalization による experimental compound administration. Youdaoplaceholder0 collagen1A1 mRNA shows さらに SACによる intentionally な inhibition が recognition められた. そ し て, BAL の マ ク ロ フ ァ ー ジ number は BLM と cast with LPS に よ り raised plus す る が, test of compound cast and に よ り deliberately low に す る こ と が わ か っ た.

项目成果

臨床病態を反映した間質性肺炎動物モデルの確立

反映临床病理的间质性肺炎动物模型的建立

• 发表时间: 2023
• 作者: 山田 侑子;倉田 厚;高橋 達彦;藤田 浩司;高木 央;高江洲 央;荻原 優衣; 黒田 雅彦;月岡卓馬
• 通讯作者: 月岡卓馬