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Differentiation of the expression of adenosine receptor affect LPS-induced cytokine production by leukocytes

腺苷受体表达的分化影响LPS诱导的白细胞细胞因子的产生

基本信息

批准号：
19592164
负责人：
OHURA Kiyoshi
金额：
$ 3万
依托单位：
Osaka Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

アデノシン受容体ファミリーを介したシグナル伝達機構は、炎症の惹起と収束のバランスの維持に関与していると考えられているが、詳細な時空間的発現動態は未だ不明である。そこで本研究では、(1)in vivo 及び in vitro における、アデノシン受容体ファミリーの詳細な発現動態及び発現細胞の同定、(2)アデノシン受容体の時空間的制御機構の解明を試みた。その結果、マウス皮膚創傷治癒モデル(in vivo 解析)では、炎症期において、アデノシン受容体 A1、A2A、A2B、A3 の発現が認められた。次に、マクロファージによるアデノシン受容体の発現変動を調べるため、マウス腹腔内よりマクロファージを採取し、培養条件下において LPS 刺激を行い、各種アデノシン受容体の発現変動を RT-PCR 法を用いて調べた(in vitro 解析)。その結果、アデノシン受容体 A2A の遺伝子発現は6時間後に高発現が認められ、その後24時間後には減弱した。また、アデノシン受容体 A2B の遺伝子発現に関しては、1時間後から高発現が認められた。高発現は12時間持続した後、24時間後には減弱した。一方、アデノシン受容体 A1 及び A3 の発現は認められなかった。以上の結果より、炎症期におけるマクロファージは、アデノシン受容体 A2A 及び A2B を介して、炎症の惹起と収束のバランスを維持していると示唆された。さらに、マクロファージにおけるアデノシン受容体 A2A の時空間的発現動態を調べるため、アデノシン受容体 A2A に GFP(緑色蛍光物質)を結合させたプラスミドを構築し、ライブイメージング解析を試みた。本研究成果により、炎症期においては、アデノシン A2A 及び A2B 受容体が中心となって役割を担っていることが示唆された。

アデノシンReceiver ファミリーを Introduction したシグナル伝reach the mechanism は, inflammation の cause と tighten のバランスMaintenance of the relationship between maintenance and testing, and the details of the current dynamics of time and space are unknown. In this study, (1) in vivo and in vitro Detailed な発appearance dynamics and び発appearance cells of における and アデノシン receptor ファミリーのの同定, (2) アデノシン The control mechanism of time and space of the アデノシン body is explained and tested.そのRESULT, マウスSkin wound healing モデル(in vivo analysis)では, inflammatory phase において, アデノシン receptor A1, A2A, A2B, A3 の発见が见められた. Subaru, Makoto ァージによるアデノシンReceiver の発appears to move を Adjustment べるため, マウス intraperitoneal よりマクロファージを collected し, において under culture conditions LPS stimulates the action of various receptors, and the RT-PCR method is used to adjust the receptors (in vitro analysis).そのresult, アデノシンReceiver A2A の伝子発appears は高発appears がcognize められ after 6 hours, and その后 24 hours later には weakens した.また、アデノシンReceiver A2B の伝子発appearsに关しては、1 time later から高発appearsがcognizeめられた. Takaharu will appear after 12 hours and will weaken after 24 hours. On the one hand, the recipients A1 and A3 of the アデノシン are recognized by the められなかった. The results of the above are: inflammatory phase におけるマクロファージは, アデノシン receptor A2A and び A2B The cause of inflammation and the restraint of inflammation are maintained.さらに、マクロファージにおけるアデノシンReceiver A2Aに GFP (green phosphorescent substance) is combined with させたプラスミドをconstructed and ライブイメージングanalyzed and tested. The results of this research are: により, inflammatory phase においては, アデノシン A2A and び A2B The center of the recipient body is the center of the body.