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マウスB-1細胞とマクロファージのLPSへの応答の相違におけるIFN-βの役割

IFN-β 在小鼠 B-1 细胞和巨噬细胞对 LPS 差异反应中的作用

基本信息

批准号：
15790229
负责人：
小出直樹
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Aichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790229/
关键词：
LPS IFN-gamma B-1細胞 Nitric oxide IFN-beta

项目摘要

マウスB hybridomaの一つで、当初、LPSへのB細胞の反応を見るために作られた細胞株TH2.52が、B-1に特徴的なCD5、IgM、Mac-1を発現したB-1様の細胞であることをこれまでに我々は報告した。B-1細胞は、様々な性質からマクロファージとの類似性が指摘されているが、詳しいことは不明な点が多い。そこで、この細胞を用いて、マクロファージと、特にLPSへの反応性について、調べることを試みた。TH2.52はLPSレセプター(Toll-like receptor 4、CD14)を発現しているために、低濃度(10ng/ml以下)のLPSにも反応し、それによるシグナル伝達が認められた。さらに、この細胞は、IFN-gamma(IFN-γ)に感受性が高く、IFN-γによってmacrophage様に分化することや、多量のnitric oxide(NO)が産生され、それによって一部にapoptosisが誘導されることがわかった。IFN-γと異なり、LPSによるNOの産生は認められず、TNF-alpha(TNF-α)やIL-6の産生はIFN-γによるものとほぼ同様であった。TNF-αやIL-6と異なり、LPSによるNOの産生には、IFN-beta(IFN-β)の産生が重要なことが、報告されている。この細胞での、LPSによるIFN-βの発現をRT-PCRで半定量的にみたところ、IFN-βの発現がされていないことがわかった。Real-time PCRを用いて、IFN-βの発現を調べたところ、マクロファージ細胞株RAWがLPSによって高いIFN-βの発現がみられるのに対して、TH2.52では全く発現が見られなかった。これにより、この細胞でLPSによるNOの産生がみられない原因の一つにLPSによるIFN-βの発現がみられないことが考えられた。リコンビナントIFN-βを加えたところ、LPSによるNOの産生は変化しなかったことから、IFN-βへの反応性が低いこともLPSによるNOの産生がみられない原因と考えられた。これにはIFN-βのreceptorの発現が低いことや、IFN-βreceptorからの伝達がよわいことが原因として考えられた。IFN-βへの反応を再度確認し、報告する予定である。

The expression of CD5, IgM and Mac-1 in B-1 cells was reported in cell line TH2.52 and B-1. B-1 cells are characterized by similarity, specificity, and specificity. In addition to the above, the cell phone is also used in the middle of the game, and the LPS is used in the middle of the game. TH2.52 was detected in LPS receptor (Toll-like receptor 4, CD14) at low concentrations (below 10ng/ml). In this case, the cells were highly susceptible to IFN-γ, and IFN-γ induced macrophage differentiation, resulting in a large amount of nitric oxide(NO) being produced and some apoptosis being induced. IFN-γ mRNA, LPS mRNA, NO mRNA, TNF-alpha (TNF-α), IL-6 mRNA, IFN-γ mRNA, TNF-α mRNA, TNF-α mRNA, IL-6 mRNA, IFN-γ mRNA, TNF-α mRNA, IL-6 mRNA, IFN-γ mRNA, TNF-α mRNA, TNF-α mRNA, TNF-α, IL-6, LPS, NO, IFN-beta(IFN-β) production are important factors in the production of TNF-α, IL-6, LPS, NO and IFN-β. The expression of IFN-β in these cells and LPS was detected by RT-PCR. Real-time PCR was used to modulate IFN-β production in RAW cell line, and TH2.52 was fully detected. The production of LPS, NO and IFN-β in these cells is due to the presence of LPS, NO and IFN-β. The production of IFN-β and LPS is the main reason for the increase of IFN-β and LPS. The expression of IFN-β receptor is low, and the expression of IFN-βreceptor is high. IFN-beta antibody is reconfirmed and reported as predetermined.