膜局在プローブの汎用的開発手法の実現による胚発生下の内在性Wnt動態の可視化

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本研究は、基礎生物学・医薬学上の主要な研究対象であるGタンパク質共役型受容体（GPCR）のリガンドの生体内での時空間的動態を可視化することを目標に掲げ、膜局在型のプローブの開発に汎用可能な大規模なスクリーニング法を開発することを目的とする。具体的には以下の３項目に分割して研究遂行する計画を立てた。１．分裂酵母においてGPCRのリガンド応答を可視化するバイオプローブのスクリーニング系の整備２．マイクロ流体デバイスを利用した分裂酵母の並列ライブイメージング系の確立３．ライブイメージングした特定の細胞を選択的に回収する機構の実現本年度は、これら３項目のうち、もっとも汎用性が高く、他の系にも応用可能な新規技術となることが見込まれる、「３．ライブイメージングした特定の細胞を選択的に回収する機構の実現」に主として取り組んだ。本研究では、この実現に、デバイスの側の工夫ではなく、光遺伝学を利用した細胞の側での工夫によってアプローチしている。本年度の検討において、すでに基本的な概念実証を終え、基本的には当初の想定した戦略において実現できるのではないかという手ごたえを得るに至った。他方、今後本系を１、２と組合わせて実用化するうえでは、ONとOFFをより明確に切り替える機構が必要であることも明らかになり、次年度以降の研究によって、この解決が望まれる。また、１・２に関連してバイオセンサーを利用した分裂酵母のライブイメージングの基盤整備を兼ねて行っていた研究プロジェクトにおいて、一定の進捗があり、当該成果をPreprintとして公開し、国際誌に論文投稿中である。