膜局在プローブの汎用的開発手法の実現による胚発生下の内在性Wnt動態の可視化

通过实现膜定位探针的多功能开发方法，可视化胚胎发育过程中的内源性 Wnt 动态

• 批准号: 22K15115
• 负责人: 杉山 博紀
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Center for Novel Science Initatives, National Institutes of Natural Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15115/
• 关键词: 光遺伝学; 分裂酵母; バイオセンサー; マイクロ流体デバイス; ライブイメージング

本研究は、基礎生物学・医薬学上の主要な研究対象であるGタンパク質共役型受容体（GPCR）のリガンドの生体内での時空間的動態を可視化することを目標に掲げ、膜局在型のプローブの開発に汎用可能な大規模なスクリーニング法を開発することを目的とする。具体的には以下の３項目に分割して研究遂行する計画を立てた。１．分裂酵母においてGPCRのリガンド応答を可視化するバイオプローブのスクリーニング系の整備２．マイクロ流体デバイスを利用した分裂酵母の並列ライブイメージング系の確立３．ライブイメージングした特定の細胞を選択的に回収する機構の実現本年度は、これら３項目のうち、もっとも汎用性が高く、他の系にも応用可能な新規技術となることが見込まれる、「３．ライブイメージングした特定の細胞を選択的に回収する機構の実現」に主として取り組んだ。本研究では、この実現に、デバイスの側の工夫ではなく、光遺伝学を利用した細胞の側での工夫によってアプローチしている。本年度の検討において、すでに基本的な概念実証を終え、基本的には当初の想定した戦略において実現できるのではないかという手ごたえを得るに至った。他方、今後本系を１、２と組合わせて実用化するうえでは、ONとOFFをより明確に切り替える機構が必要であることも明らかになり、次年度以降の研究によって、この解決が望まれる。また、１・２に関連してバイオセンサーを利用した分裂酵母のライブイメージングの基盤整備を兼ねて行っていた研究プロジェクトにおいて、一定の進捗があり、当該成果をPreprintとして公開し、国際誌に論文投稿中である。

は this study, basic biology, medical 薬 の な main research like で seaborne あ る G タ ン パ ク type total service quality by the capacity of body (GPCR) の リ ガ ン ド の born in vivo で の when space dynamic を visualization す る こ と を target に first white jasmines げ, membrane type in の プ ロ ー ブ の open 発 に domestic may な large-scale な ス ク リ ー ニ ン グ method を open 発 す る こ と を purpose と す る. The specific に is divided into に て to study the implementation of the する plan を and てた. 1. Split yeast に お い て GPCR の リ ガ ン ド 応 answer を visualization す る バ イ オ プ ロ ー ブ の ス ク リ ー ニ ン グ の development 2. マ イ ク ロ fluid デ バ イ ス を using し た split yeast の parallel ラ イ ブ イ メ ー ジ ン グ の established 3. ラ イ ブ イ メ ー ジ ン グ し た specific の cells を sentaku に back 収 す る institutions の be now this year は, こ れ ら 3 project の う ち, も っ と も domestic high が く, he の に も 応 with new rules may な technology と な る こ と が see 込 ま れ る, "3. ラ イ ブ イ メ ー ジ ン グ し た specific の cells を sentaku に back 収 す る institutions の be now" に main と し Youdaoplaceholder0 take the て group んだ. This study で は, こ の be に, デ バ イ ス の side の time で は な く, light but 伝 を using し た cells の side で の time に よ っ て ア プ ロ ー チ し て い る. This year の beg に 検 お い て, す で に basic な concept be を eventually え, basic に は の original scenarios し た 戦 slightly に お い て be presently で き る の で は な い か と い ご う hand た え を must る に to っ た. Fang, 1, 2, in future, our department を と combination わ せ て be used chemical す る う え で は, ON と OFF を よ り clear cut に り for え る institutions が necessary で あ る こ と も Ming ら か に な り, annual to drop の research に よ っ て, こ の solve が hope ま れ る. ま た, 1, 2 に masato even し て バ イ オ セ ン サ ー を using し た split yeast の ラ イ ブ イ メ ー ジ ン グ の base plate and servicing を ね て line っ て い た research プ ロ ジ ェ ク ト に お い て, certain の into 捗 が あ り, when the results を Preprint と し て し publicly, international volunteers に paper submitted in で あ る.

项目成果

Live-cell imaging provides direct evidence for a threshold in CDK activity at the G2/M transition

活细胞成像为 G2/M 转变时 CDK 活性阈值提供了直接证据

• DOI: 10.1101/2023.03.26.534249
• 发表时间: 2023
• 期刊: BioRxiv
• 作者: Sugiyama Hironori;Goto Yuhei;Kondo Yohei;Coudreuse Damien;Aoki Kazuhiro
• 通讯作者: Aoki Kazuhiro

Live imaging of CDK activity by FRET biosensor in fission yeast Schizosaccharomyces pombe

通过 FRET 生物传感器对裂殖酵母裂殖酵母中 CDK 活性进行实时成像

• 发表时间: 2022
• 作者: Hironori Sugiyama;Yuhei Goto;Yohei Kondo;Kazuhiro Aoki
• 通讯作者: Kazuhiro Aoki

CDK活性ライブイメージングによる細胞周期制御の定量的理解

通过 CDK 活性实时成像定量了解细胞周期控制

• 发表时间: 2022
• 作者: 杉山博紀;後藤祐平;近藤洋平;青木一洋
• 通讯作者: 青木一洋

CDK活性のライブイメージングによる，分裂酵母Schizosaccharomyces Pombeの動的な細胞周期制御の特徴づけ

通过 CDK 活性实时成像表征裂殖酵母裂殖酵母的动态细胞周期控制

• 发表时间: 2022
• 作者: 杉山博紀;後藤祐平;青木一洋
• 通讯作者: 青木一洋