低分子量G蛋白質Rasの標的蛋白質RalGDSの生理機構の解析

低分子量G蛋白Ras靶蛋白RalGDS的生理机制分析

• 批准号: 10770051
• 负责人: 岸田 想子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770051/
• 关键词: Ras; エンドサイトーシス; Ral; 低分子量G蛋白質; 翻訳後修飾; RalGDS

低分子量G蛋白質Rasの標的蛋白質は、蛋白質リン酸化酵素RafやRalGDSをはじめ複数見出されており個々の標的蛋白質がそれぞれ固有の細胞内情報伝達経路を介して細胞機能を制御する。RalGDSは低分子量G蛋白質Ralに対するGDP/GTP交換反応促進蛋白質である。私共は、RalGDSがRafと協同的に遺伝子発現を促進することやRalを活性化することを見出していた。Ralは細胞膜と細胞内小胞に存在するため分泌に関与することが予想されていたが、Ralが制御する細胞機能は不明であった。Ralは下流のRalBP1、POB1にシグナルを伝達し、POB1がEps15やEpsinなどエンドサイトーシスを制御する蛋白質と結合することを明らかにした。そこで本研究では、RalGDSの下流のこれら分子の種々の変異体を培養細胞で発現させて、RalGDSを介するシグナル伝達経路がインスリンやEGF受容体のエンドサイトーシスに関与するか否かを解析した。培養細胞にドミナントアクティブ型Ralやドミナントネガティブ型Ral、膜移行不能型Ralを導入したところ、EGFやインスリン受容体のエンドサイトーシスが抑制された。したがって、これら受容体のエンドサイトーシスには、RalのGTP型とGDP型を変換することおよび翻訳後修飾を受けて細胞膜に局在することが重要であることが明らかになった。RalBP1のC末端側のRalやPOB1と結合する領域を発現させた細胞では、EGFやインスリン受容体のエンドサイトーシスが抑制された。したがって、Ras/RalGDSを介するシグナル伝達経路は、下流のRal/RalBP1/POB1を介してEGFやインスリン受容体のエンドサイトーシスの制御に関与することが明らかとなった。

Low molecular weight G protein Ras target protein, protein acidification enzyme Raf and RalGDS, multiple expression of the target protein, including intrinsic intracellular information pathway, control of cell function RalGDS is a low molecular weight protein called Ral. Raf, RalGDS, and Ral have been working together to promote the development of new technologies. Ral cell membrane and intracellular small cell existence, secretion and regulation of cell function unknown Ral is the downstream protein binding agent for RalBP1, POB1, Eps15 and Epsin. In this study, we analyzed the relationship between the development of RalGDS and EGF receptor in cultured cells. Cultured cells were introduced with EGF, Ral, Ral. In addition, it is important to change the GTP type and GDP type of receptor. Ral and POB 1 on the C-terminal side of RalBP 1 bind to the domain of the cell, and EGF binds to the domain of the receptor. Ras/RalGDS is the medium for controlling the flow of the receiver and downstream Ral/RalBP1/POB1.

项目成果

Nakashima,S.: "Small G protein Ral and its downstream molecules regulate endocytosis of EGF and insulin receptors"EMBO J.. 18・13. 3629-3642 (1999)

Nakashima, S.：“小G蛋白Ral及其下游分子调节EGF和胰岛素受体的内吞作用”EMBO J.. 18・13 (1999)。

Kishida,S.: "DIX domains of Dvl and Axin are necessary for protein interactions and their ability to regulate β-catenin stability." Mol.Cell.Biol.(in press). (1999)

Kishida, S.：“Dvl 和 Axin 的 DIX 结构域对于蛋白质相互作用及其调节 β-连环蛋白稳定性的能力是必需的。（正在出版）。”

Kishida,S.: "DIX domains of Dvl and Axin are necessary for protein interactions and their ability to regulate β-catenin stability"Mol.Cell.Biol.. 19・6. 4414-4422 (1999)

Kishida, S.：“Dvl 和 Axin 的 DIX 结构域对于蛋白质相互作用及其调节 β-连环蛋白稳定性的能力是必需的”Mol.Cell.Biol.. 4414-4422 (1999)。

Kodama,S.: "Axin directly interacts with plakoglobin and regulates its stability."J.Biol.Chem.. 274・39. 27682-27688 (1999)

Kodama, S.：“Axin 直接与斑珠蛋白相互作用并调节其稳定性。”J.Biol.Chem.. 274・39 (1999)。

Kishida, M.: "Axin prevents Wnt-3a-induced accumulation of β-catenin."Oncogene. 18(4). 979-985 (1999)

Kishida, M.：“轴蛋白可防止 Wnt-3a 诱导的 β-连环蛋白积累。”18(4) (1999)。