哺乳類における容量性Ca^<2+>流入機構の解明

哺乳动物电容性Ca^2+内流机制的阐明

• 批准号: 10770046
• 负责人: 村山 尚
• 金额: $ 0.45万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770046/
• 关键词: 容量性カルシウム流入; transient receptor potential

容量性Ca^<2+>流入(Capacitative Ca^<2+> entry;CCE)機構は細胞内Ca^<2+>ストアのCa^<2+>が減少または枯渇した場合に起こる細胞外からのCa^<2+>流入であり,細胞膜の受容体刺激およびthapsigargin,cyclopiazonic acidなどのCa^<2+>ポンプ阻害薬により引き起こされることが多くの細胞で観察されている.しかし,この機構の本質については不明な点が多く残されている.最近の研究からtransient receptor potential(trp)ファミリーと呼ばれる一群のタンパク質がCCEチャネルの本体であることが提唱されている.本研究ではCCE機構を解明する糸口としてtrpに対する特異的な抗体を作成し,哺乳類細胞におけるtrpの発現とその基本的な性質を明らかにすることを目的とした.trpには現在までに7種類のアイソフォームが知られている.昨年度の研究において全てのアイソフォームで高く保存されている領域(trp-c)および各アイソフォーム特異的な領域(trp-s)について特異的抗体を得た.本年度はこれらの抗体を用いて種々の組織におけるtrpの発現パターンを観察した.抗trp-cは骨格筋,心筋,平滑筋などの各種筋組織および神経細胞の細胞膜を特異的に染色した.その染色強度は組織間で異なっていた.骨格筋および心筋では細胞膜に加えてT管も染色されていた.一方,trp-sは各アイソフォーム特異的な組織分布を示した.以上の結果はtrpタンパク質が組織特異的に発現し,それぞれの組織で独自の機能をもつ可能性を示唆するものである.

Capacitive Ca ^<2+> entry (CCE) mechanisms reduce intracellular Ca^<2 +> loss and initiate extracellular Ca^<2 +> influx, and cellular membrane responses are stimulated by thapsigargin,cyclopiazonic acid and Ca^<2+> inhibition. The nature of this institution is unclear, and many things remain unknown. Recent studies have shown that the transient receptor potential(trp) is a complex complex of CCE receptor potentials. In this study, the CCE mechanism was clarified, and specific antibodies were produced. In mammalian cells, the basic properties of TRP development were clarified, and 7 types of TRP were identified. Last year's research focused on the development of a complete range of antigen-specific antibodies that are highly conserved in the domain (trp-c) and specific to each individual domain (trp-s). This year, the use of antibodies in the production of seed tissue was observed. Anti-trp-c specific staining of various tendon tissues and cell membranes of nerve cells. The staining intensity varies from tissue to tissue. T-tube staining was performed on the cell membrane. A side,trp-s, each with a unique tissue distribution. These results indicate the possibility of tissue-specific development of tissue properties and the possibility of independent function of tissue.

项目成果

Murayama,T.: "Further Characterization of the type 3 ryanodine receptor (RyR3) purified from rabbit diaphragm"Journal of Biological Chemistry. 274. 17297-17300 (1999)

Murayama,T.：“从兔隔膜中纯化的 3 型兰尼碱受体 (RyR3) 的进一步表征”生物化学杂志。

Murayama,T.: "Effects of caffeine and Mg^<2+> on the Ca^<2+> activation and inactivation sites of ryanodine receptor" Japanese Journal of Pharmacology. 76. 201P (1998)

Murayama,T.：“咖啡因和Mg^2>对兰尼碱受体Ca^2激活和失活位点的影响”日本药理学杂志。

村山 尚: "特異的抗体による哺乳類横隔膜の3型リアノジン受容体(RyR3)の精製およびその性質の検討" 日本薬理学雑誌. 112. 65P (1998)

Takashi Murayama：“使用特异性抗体纯化哺乳动物隔膜的 3 型兰尼碱受体 (RyR3) 并检查其特性”《日本药理学杂志》112. 65P (1998)。

村山 尚: "続心臓代謝実験法,II受容体に関する実験 (Ryanodine receptor)" 六法出版社,東京, 101-107 (1998)

Takashi Murayama：“继续心脏代谢实验方法，II受体（Ryanodine受体）的实验”Rokupo Publishing，东京，101-107（1998）

Murayama,T.: "Role of Mg^<2+> in C^<2+> Induced C^<2+> Release through Ryanodine Recetors of Frog Skeletal Muscle:Modulations by Adenine Nucleotides and Caffeine."Biophysical Journal. 78. in press (2000)

Murayama,T.：“Mg^<2> 在 C^<2> 诱导 C^<2> 通过青蛙骨骼肌 Ryanodine 受体释放中的作用：腺嘌呤核苷酸和咖啡因的调节。”生物物理学杂志。