血清中アシルグリセロールの一斉分析法の構築 -中性脂肪測定の国際標準化に向けて-

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中性脂肪は脂質異常症の評価や冠動脈疾患リスク群の評価に使用される臨床検査項目である。総コレステロールやHDLコレステロールとは独立した冠動脈疾患のリスク因子と考えられており、88.5mg/dL増えるごとの相対危険度が1.34であるという報告1)や中性脂肪高値とnon-HDL-C高値で心筋梗塞リスクが増加するという報告がある2)。中性脂肪定量法は単一の分子を測定しているのではなく、アシルグリセロールと呼ばれる分子群を測定している。アシルグリセロールの分子は、グリセロールのOH基に脂肪酸がエステル結合しており、分子群には脂肪酸が3つ結合したトリアシルグリセロール、2つ結合したジアシルグリセロール、1つ結合したモノアシルグリセロール、脂肪酸が結合していない遊離グリセロールが存在する。国内で測定されている方法は血中の遊離グリセロールを測り込まない「グリセロール消去法」であるが、国際的には全てのグリセロールを測定する「グリセロール未消去法」が主流である。これらの測定法はものさしである標準物質は統一されているが、同じ分子群を対象に測定していないことによる測定値の違いが問題になっており、中性脂肪測定の標準化が米国の疾病対策予防センターを中心に議論されている。しかし、遊離グリセロールの測定意義や存在様式が明らかでないこと、ジアシルグリセロールやモノアシルグリセロールの存在比や疾患との関係が未だに解明されていないため、どちらの測定法を国際標準とすべきか意見が分かれている。中性脂肪の分子種を個別に定量する方法はあるが、複雑な分析工程は目的物質のロスにつながるため、測定精度を担保するためには一斉分析法の確立が必須である。本研究では遊離グリセロールからトリアシルグリセロールまでの分子種をガスクロマトグラフ質量分析装置(GCMS)で一斉定量する測定系を構築することを目的として研究を行い、以下の結果を得た。1) 血清中のグリセロールからジアシルグリセロールまでをGCMSで定量分析する測定系を構築した。2) トリアシルグリセロールは、GCカラムを変更することによって定量分析することが可能である。3) 血清中に存在するコレステロールが測定感度に影響しており、コレステロールを除去することによって高感度分析が可能である。文献1) Iso H, et al. Am J Epidemiol. 2001 ; 153 : 490-9.2) Okamura T, et al. Atherosclerosis. 2009 ; 203 : 587-92.