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次世代の臨床検査定量分析法の開発－ＭＳによるアルギニンバソプレシン定量法の開発－

新一代临床试验定量分析方法的开发 - 利用MS的精氨酸加压素定量分析方法的开发 -

基本信息

批准号：
26931014
负责人：
川崎健治
金额：
$ 0.32万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26931014/
关键词：
質量分析法 AVP 臨床検査への応用

项目摘要

AVPをWeinsteinらの方法によって抽出して質量分析法で測定する方法は確立されているが、非常に煩雑な方法であり、試料の前処理工程の技術習得、測定時間、費用から考えて臨床検査には適用できない。本研究は、抽出条件をいかに軽減できるかが最も重要な課題として有機溶媒による前処理や固相抽出を工夫しAVPを測定する条件を検討することとした。2014年にヒューストン大学のZhangらによって固相抽出法を利用した質量分析法によるAVPの分析法が報告された(Zhang D, Rios DR, J Pharm Biomed Anal. 2014 Oct ; 99 : 67-73.)。この報告によってAVPの抽出は数時間に短縮されたが、血清や尿からAVPを直接的に分析することはできないため、臨床検査のように多検体の分析を行わなければならない分析に応用することは難しい。そこで本研究は抗血清による特異性を質量分析に応用したImmuno-mass spectrometryによる分析に方針を変えて検討を行った。AVPの抗体は入手することができなかったため、同様に臨床検査で重要なステロイドホルモンであるアルドステロンをターゲットとして予備的実験を開始した。NHSが付加してある磁性ビーズに抗ヒトアルドステロン抗体を結合させて抽出した血清中アルドステロン及びアルドステロン標準液と反応させ、RIA法で分析した。抗体ビーズと血清及び標準液の反応性を確認することが可能であり、標準液で作製した希釈系列で測定の直線性を得ることができた。今後は、MALDI-MSで定量的に分析可能かどうか検討し、AVPの測定に応用する。

Weinstein's method of extraction, quality analysis, determination, method establishment, special procedures, sample pretreatment engineering, technical acquisition, determination time, cost, examination, clinical investigation, etc. This study focuses on the extraction conditions and the determination of solid phase extraction time. Zhang D, Rios DR, J Pharm Biomed Anal. 2014 Oct ; 99 : 67-73.)。The number of AVPs extracted from this report was shortened, and the serum and urine AVPs were analyzed directly. The clinical investigation and analysis of multiple samples were performed. This study was conducted in the context of quality analysis of antisera and Immuno-mass spectrometry. AVP antibodies are important for clinical investigation and preparation. The NHS has been working on the determination of anti-tumor antibodies in serum by ELISA and RIA. The linearity of antibody serum and standard solution was confirmed. In the future, MALDI-MS quantitative analysis may be used in the determination of AVP.