QProbe法を用いた薬剤耐性菌の迅速検出

QProbe法快速检测耐药菌

• 批准号: 17H00635
• 负责人: 坂井 優喜子
• 金额: $ 0.36万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17H00635/
• 关键词: 薬剤耐性菌; ESBL; MRSA

1. 研究目的微生物検査では、質量分析装置の導入により菌種の迅速な同定が可能となった。しかし、薬剤感受性試験には時間を要するのが現状である。全自動遺伝子解析装置GENE CUBE(東洋紡)は簡便・迅速(約1時間)に目的遺伝子を検出する。PCRで目的遺伝子の標的領域を増幅後、蛍光標識プローブであるQProbeを使用した融解曲線解析にて遺伝子の検出を行う。そこで本研究では、GENE CUBEを用いて血液培養陽性ボトルおよび菌株より迅速に耐性菌を検出することを目的とした。2. 研究方法と成果(1) 血液培養陽性ボトルからのMRSA検出MRSAが検出された血液培養ボトル24件を対象とした。ボトル内容物を材料としてGENE CUBEにてMRSAの検出を行った。対象24件はGENE CUBEにてMRSA 8件、MSSA 9件、MR-CNS 5件、MS-CNS 2件となり、従来法の結果と一致した。さらに詳細に検討するため菌株数を増やして検討中である。(2) 菌株からのESBL遺伝子検出当院にて保管されていたESBL陽性30株、陰性7株を対象とした。クラブラン酸(CVA)、PCR、GENE CUBEを用いてESBL遺伝子の検出を行った。PCRとGENE CUBEではESBLの型別を行った。GENE CUBEを用いたESBL遺伝子の検出は陽性30株、陰性7株で、PCR、CVAを用いた方法と一致した。GENE CUBEによるESBLの型別はPCRの結果と一致し、同時に保有する耐性遺伝子に影響されなかった。以上より、GENE CUBEは良好・迅速にESBLを検出することが示された。早期の感染症治療および感染対策において有用と考えられた。MRSAに関しては株数を増やして検討中である。

1. Objective: To study the possibility of rapid identification of microbial species by introducing microbial identification and quality analysis equipment. The time is right, the sensitivity is right. GENE CUBE is a fully automatic genetic analyzer that is easy and fast (about 1 time) to detect target genes. After the target area of PCR target genes is increased, QProbe can be used to analyze the fusion curve and detect the target genes. The purpose of this study is to detect the positive and resistant strains in blood culture. 2. Methods: Results (1) MRSA was detected in 24 blood culture samples. The content of the drug was found in GENE CUBE. The results of MRSA, MR-CNS and MS-CNS were consistent. The number of strains in the study increased. (2)The ESBL gene was isolated from 30 ESBL positive strains and 7 ESBL negative strains. CVA, PCR, GENE CUBE are used to detect ESBL genes. PCR and GENE CUBE are the types of ESBL. GENE CUBE was used to detect 30 positive strains and 7 negative strains of ESBL gene. PCR and CVA were used in the same way. GENE CUBE and ESBL types are consistent with PCR results while maintaining the effects of resistant genes. GENE CUBE is good, and ESBL is fast. Early infection therapy is useful. MRSA has increased in number.