Helicobacter pyloriの発癌遺伝子および細胞毒素遺伝子の解明

幽门螺杆菌癌基因和细胞毒素基因的阐明

• 批准号: 08770196
• 负责人: 木村 浩一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770196/
• 关键词: Helicobacter pylori; gastric ulcer; gastritis; gastric cancer; genotype

Helicobacter pyloriは、胃炎、胃潰瘍さらに胃癌との関連が指摘されている。この菌の持つ病原因子を特定することが本研究の最終的な目的である。この目的のため、平成7年度の科学研究費により、臨床分離株76株のH.pyloriについて疾患と遺伝子型の関係を調査した。その結果、十二指腸潰瘍、胃癌および胃潰瘍の各疾患それぞれに対し、統計的に有意な関連性を示す遺伝子型が存在することを見出した。このことは、H.pyloriのすべてがこれらの疾患に関与するのではなく、特定の菌株が、何らかの特別な病原因子を保有することを示唆するものである。本年度は、この実験結果を基に、病原因子、特に癌化に関係した病原因子を保有すると思われる菌株に対象を絞り、遺伝子ライブラリーを作製して、H.pyloriの病原因子を明らかにするための実験の行った。まず、癌化因子を保有していると考えられる2株のH.pyloriのDNAを抽出・精製し、制限酵素あるいはDNaseによる完全・不完全分解を行い、真核生物用発現ベクターpCD2Yにクローニングしてプラスミドライブラリーを構築した。引き続き、ライブラリーからプラスミドを抽出・精製した。こうして得られたプラスミドを、癌化因子の検査に多用されるNIH3T3細胞およびBRK(bady rat kidney)細胞にトランスフェクトし、トランスフォーム活性とイモータライゼーション活性の有無を観察した。一連の実験により、今回使用した発現ベクターpCD2Yは、強力な遺伝子発現効率を持っているものの、DNA断片のクローニング効率が低いことが判明した。このため、作製したライブラリーが癌化因子をスクリーニングするには十分でなく、癌化因子を特定することが出来なかった。このため、次年度では、数種類のベクターでライブラリーを再構築する予定である。

Helicobacter pylori, gastritis, gastric ulcer, gastric cancer and related allegations This study is aimed at identifying the pathogenic factors of these bacteria. To investigate the relationship between disease and genotype of 76 clinical isolates of H.pylori The results showed that duodenal ulcer, gastric ulcer and gastric ulcer had significant correlation with each other. The expression of H.pylori is related to the disease, specific strains, and specific pathogenic factors. This year, the results of this study showed that the pathogenic factors, especially the pathogenic factors, remained unchanged, and the pathogenic factors of H.pylori were clearly identified. DNA extraction, purification, restriction enzyme, complete and incomplete decomposition of DNA from two strains of H.pylori, and construction of DNA from two strains of H. pylori for eukaryotic development引き続き、ライブラリーからプラスミドを抽出·精制した。The activity of NIH 3T3 cells and BRK(bady rat kidney) cells was examined for the presence or absence of cancer factors. It was found that the detection rate of DNA fragments was low, and the detection rate of DNA fragments was low. This is the first time I've ever seen a cancer. This year, the next year, the number of types of re-construction of the predetermined.

项目成果

Fujii,N.: "Characterization of component-I gene of butulinum C2 toxin and PCR detection of its gene in clostridial species." Biochem.Biophys.Res.Commun.220. 353-359 (1996)

Fujii,N.：“梭状芽胞杆菌 C2 毒素成分 I 基因的表征及其基因的 PCR 检测。”

Isogai,E.: "Borrelia burgdorferi sensu Iato in an endemic enviroment : wild sika deer (Cervus nippon yesoensis)with infected ticks and antibodies" Microbiol.Immunol. 40. 13-19 (1996)

Isogai，E.：“地方性环境中的伯氏疏螺旋体：野生梅花鹿（Cervus nippon yesoensis）感染蜱虫和抗体”微生物学。免疫学。

Isogai,E.: "Cytokines in the serum and brain in mice infected with distinct spesies of Lyme disease Borrelia." Miclob.Pathog.21. 413-419 (1996)

Isogai,E.：“感染莱姆病疏螺旋体不同物种的小鼠血清和大脑中的细胞因子。”

Umemoto,T.: "Immunological studies on venereal spirochetosis of rabbits(rabbit syphilis)." J.Vet.Med.B. 43. 267-276 (1996)

Umemoto,T.：“兔性病螺旋体病（兔梅毒）的免疫学研究。”