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Helicobacter pyloriの発癌遺伝子および細胞毒素遺伝子の解明

幽门螺杆菌癌基因和细胞毒素基因的阐明

基本信息

批准号：
09770189
负责人：
木村浩一
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770189/
关键词：
Helicobacter pylori gastric ulcer gastritis gastric cancer genotype

项目摘要

Helicobacter pyloriは、胃炎、胃潰瘍さらに胃癌との関連が指摘されている。この菌の持つ病原因子を特定することが本研究の最終的な目的である。この目的のため、平成7年度の科学研究費により、臨床分離株76株のH.pyloriについて疾患と遺伝子型の関係を調査した。その結果、十二指腸潰瘍、胃癌および胃潰瘍の各疾患それぞれに対し、統計的に有意な関連性を示す遺伝子型が存在することを見出した。このことは、H.pyloriのすべてがこれらの疾患に関与するのではなく、特定の菌株が、何らかの特別な病原因子を保有することを示唆するものである。本年度は、この実験結果を基に、病原因子、特に癌化に関係した病原因子を保有すると思われる菌株に対象を絞り、遺伝子ライブラリーを作製して、H.pyloriの病原因子を明らかにするための実験を行った。まず、癌化因子を保有していると考えられる2株のH.pyloriのDNAを抽出・精製し、制限酵素あるいはDNaseによる完全・不完全分解を行い、数種類の真核生物用発現ベクターにクローニングしてプラスミドライブラリーを構築した。昨年度使用した発現ベクターpCD2Yは、DNA断片のクローニング効率が低かったため、今回数種類の発現ベクターを使用した。引き続き、ライブラリーからプラスミドを抽出・精製した。こうして得られたプラスミドを、癌化因子の検査に多用されるNIH3T3細胞およびBRK(baby rat kidney)細胞にトランスフェクトし、トラシスフォーム活性とイモータライゼーション活性の有無を観察している。

Helicobacter pylori, gastritis, gastric ulcer, gastric cancer and related allegations This study is aimed at identifying the pathogenic factors of these bacteria. To investigate the relationship between disease and genotype of 76 clinical isolates of H.pylori The results showed that duodenal ulcer, gastric ulcer and gastric ulcer had significant correlation with each other. The expression of H.pylori is related to the disease, specific strains, and specific pathogenic factors. This year, the pathogenic factors of H. pylori and the pathogenic factors of H.pylori are clearly identified. DNA extraction, purification, restriction enzyme, complete and incomplete decomposition of DNA from two strains of H.pylori and several types of eukaryotic organisms were studied. Last year's use of DNA fragments was low, and today's use of DNA fragments is low.引き続き、ライブラリーからプラスミドを抽出·精制した。In this study, NIH 3T3 cells and BRK(baby rat kidney) cells were used to investigate the activity of cancer factors.