静止期癌細胞の細胞周期導入時においてG1/Sに先行する未知のG0/G1 event

在静止癌细胞进入细胞周期期间，G1/S 之前的未知 G0/G1 事件

• 批准号: 08770951
• 负责人: 太田 智彦
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770951/
• 关键词: 癌; 細胞周期; G0期; cdc2 variant; p27

我々はG0期で停止し得る癌細胞を用い、G0期より細胞周期に入るときに、G1/S期でcdc2,cdk2,cyclin-D1の発現、Rbの燐酸化が起こるが、これに先行してそれまで発現していたcdk2とcyclin-D1がいったん消失し、再びRbの燐酸化と同時に発現することを報告した(Exp.Cell Res.225:85-92,1996)。今回、このcdk2とcyclin-D1の発現消失と関連する、p15,p16,p18,p21,p27などのcdk inhibitor(CKI)の発現を解析した。その結果、これらのCKIのうち、p27はG0期に強発現し、細胞周期導入時にRbの燐酸化に先行してcdk2とcyclin-D1の発現消失に伴って発現減弱することが分かった。すなわちG0期においてはcdkとcyclinはp27とのcomplexの形で存在し、増殖刺激により、まずこのcomploex全体のdegradationが起こることが示唆された。これとは別に我々は細胞周期制御遺伝子の異常を、RT-PCRを用いたクローニング法を行ってスクリーニングした結果、deletion typeのcdc2 variant(Δcdc2)を発見した(日本DNAデータバンク♯D88357)。Δcdc2は乳癌組織、乳癌細胞株(MCF7)には発現を認めたが、正常ヒト線維芽細胞株(NHLF,HDF)やmitogen刺激後増殖期ヒトリンパ球からは検出されなかった。Δcdc2は正常なcdc2に比べ、57のアミノ酸を欠失した260のアミノ酸よりなる蛋白質で、cyclin binding siteおよびATP binding site(Lys33)は保たれているが、Thr161を含むいわゆるTループが欠如している。このことから、Δcdc2はCAKによるThr161の燐酸化というシグナルなしに、酵素活性を発揮する可能性をもち、DNA合成完了の前に細胞を分裂に導き、癌細胞の遺伝子異常の過程に関与しているものと思われる。現在蛋白レベルでの機能を解析中である。

We report that cancer cells are arrested at G0 stage, at G0 stage, at G1/S stage, cdc2, cdk2,cyclin-D1 and Rb phosphorylation begin and disappear at G1/S stage (Exp.Cell Res. 225:85- 92, 1996). The occurrence and disappearance of CDK2 and cyclin-D1 in this paper are related to the occurrence and disappearance of CDK inhibitor(CKI) in p15,p16,p18,p21,p27. As a result, CKI and p27 are strongly expressed in G0 phase, Rb phosphorylation occurs first during cell cycle introduction, cdk2 and cyclin-D1 disappear, and the expression of p27 decreases. In the first phase, the cdk cyclin p27 complex exists, and the degradation of the entire complex begins. The results of RT-PCR analysis, deletion type of cdc2 variant(Δ cdc2) were found in the abnormal cell cycle control gene (D88357).Δ cdc2 is a breast cancer tissue, breast cancer cell line (MCF7), normal line cell line (NHLF,HDF) and mitogen stimulated growth period.Δ cdc2 is normal, cdc2 is 57 and cdc2 is 260. Protein, cyclin binding site and ATP binding site(Lys33) are preserved, Thr161 is 57 and cdc2 is 57. Phosphorylation of Thr161 in CAK, possibility of enzyme activity, induction of cell division before completion of DNA synthesis, and thinking about abnormal processes of cancer cell genetics. Now the protein is in the process of analyzing its function.

项目成果

太田智彦: "Analysis of Cdc2 and Cyclin D1 Expression in Breast Cancer by Immunoblotting" Breast Cancer (J.Jpn Breast Cancer Soc.). 4・1. 17-24 (1997)

Tomohiko Ota：“通过免疫印迹分析乳腺癌中的 Cdc2 和 Cyclin D1 表达”乳腺癌（J.Jpn Breast Cancer Soc.）4·1（1997）。

太田智彦: "Behavior of the Cell Cycle-Associated Proteins in an Unusual GO-Arrestable Cancer Cell Line" Experimental Cell Research. 225. 85-92 (1996)

Tomohiko Ota：“异常 GO 抑制癌细胞系中细胞周期相关蛋白的行为”实验细胞研究 225. 85-92 (1996)。