癌細胞におけるLRP蛋白細胞外ドメインの糖鎖形成不全と細胞増殖抑制との関係

LRP蛋白胞外结构域糖基化缺陷与癌细胞生长抑制的关系

基本信息

  • 批准号:
    07770965
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.51万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1995
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1995 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

我々は培養フラスコ中でconfluentになった後、増殖を停止し、栄養飢餓状態で300日以上G0期で停止し得る癌細胞を用い、細胞増殖停止に伴うレセプター型プロテイン・チロシン・キナーゼの細胞外ドメイン糖鎖の変化について研究した。ところが、免疫沈降およびwestern blottingに用いたLRPやLARなどの抗体の条件が悪く、他にも適切な抗体を入手できなかったため、目的の蛋白が検出できず、これらについての結論はみちびきだせなかった。しかしながら、この実験の経過中、同時にこの細胞の細胞周期関連蛋白の動態を調べたところ、G0期静止に必要な条件はcdc2蛋白の消失とRb蛋白の脱燐酸化のみで、cdk2,cyclin-A,cyclin-D1,およびMAP kinaseが発現していも、細胞はG0期に移行し得ることが判明した。さらに、G0期より細胞周期に入るときのこれらの蛋白の発現を詳細に調べたところ、G1/S期のいわゆるStart pointでcdc2,cdk2,cyclin-D1の発現、Rbの燐酸化が一斉に起こるが、この変化に先行してそれまで発現していたcdk2とcyclin-D1がいったん消失し、再びRbの燐酸化と時期を一致して発現していることが分かった。これらの結果については、次項の雑誌にて発表予定である。今後の研究課題としては、このG1/Sのstart pointに先行した、cdk2とcyclin-D1の発現消失と関連する細胞周期関連因子間の相互作用があるかどうかを検証することである。すなわち、p15,p16,p21,p27 などのcdk inhibitor(CKI)の発現状況、cdk kinase活性、cdk,cyclinとCKIの結合状態を解析した後,このG0/G1移行期を通過した細胞が、S期に移行せずに再びG0期に戻ることが可能かどうかを検索する予定である。
I have developed cancer cells in the G0 stage after cultivating a confluent medium, and the reproduction has stopped, and the starvation state has been maintained for more than 300 days. Cellular use, cell proliferation cessation and cessation of cell proliferation.シン・キナーゼの extracellular ドメインsugar lock の変化について research した.ところが、immune sedimentation およびwestern For blotting, use the conditions of the LRP and LAR antibodies and the appropriate antibodies for blotting.できなかったため、Objective protein が検出できず、これらについての Conclusion はみちびきだせなかった. Necessary conditions for the dynamic regulation of cell cycle-related proteins and the quiescence of G0 phaseはcdc2 protein disappeared and Rb protein dephosphorylated のみで, cdk2, cyclin-A, cyclin-D1, およびMAP The appearance of kinase has been confirmed, and the transition of cells into the G0 phase has been determined. Start of the G0 phase of the cell cycle pointでcdc2,cdk2,cyclin-D1の発appear,Rbの琐oxidationが一斉に出こるが、この変化に前行してそれまで発Now the cdk2 and cyclin-D1 have disappeared, and the period of acidification of Rb has been consistent. The result of これらのについては and the sub-item の雑志 にて発 table are predetermined である. Future research topics: としては、このG1/Sのstart The point is the first, the cdk2 and the cyclin-D1 are now gone and the connection is the interaction between the cell cycle related factors.すなわち、p15,p16,p21,p27 などのcdk inhibitor(CKI) current situation、cdk Kinase activity, cdk, cyclin and CKI binding state analysis are done after the G0/G1 transition phase It is possible to pass the cells through the S phase and migrate to the S phase and then to the G0 phase.

项目成果

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知道了