角膜上皮細胞、実質細胞の増殖抑制因子に関する研究

角膜上皮细胞和基质细胞生长抑制因子的研究

• 批准号: 08771529
• 负责人: 山田 昌和
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771529/
• 关键词: 角膜上皮細胞; 角膜実質細胞; 細胞増殖; epidermal pentapeptide

Epidermal pentapeptide(以下、EPPと略す)は1987年にReicheltらによりマウス皮膚より分離、精製された分子量517のペプタイドであり、皮膚や食道上皮細胞の細胞増殖を抑制することが知られている。EPPの角膜上皮細胞、実質細胞の細胞増殖に与える影響をラット由来の培養細胞系を用いて検討した。実験にはSprague-Dawleyラットから得られた初代培養角膜上皮細胞と継代角膜実質細胞を用い、5%ウシ胎児血清を含むDMEM/Ham′sF-12に10^<-6>から10^<-14>Mまでの種々の濃度のEPPと1μMのcolchicineを加えた培養液中で培養した。6時間後に培養細胞を酢酸アルコールで固定しaceto-orcein染色を行い、コルヒチンによりM期で停止された細胞分裂像(c-mitosis)を光学顕微鏡下で計測することにより、細胞増殖頻度を求めた。培養角膜上皮細胞では、対照での細胞増殖頻度は31.3±1.5/mm^2/hourであったのに対し、EPPの存在下では10^<-8>Mの濃度で18.3±2.7、10^<-10>Mの濃度で16.2±1.7と細胞増殖頻度は有意に低下した。細胞増殖頻度は10^<-6>M、あるいは10^<-12>M以下のEPP濃度では有意の変化を示さず、全体としてbell shapeの用量反応曲線を示した。EPPを2時間毎に加えるとより低濃度(10^<-12>M)でも細胞増殖を抑制するようになり、EPPを加えない培養液に交換すると細胞増殖は対照と同等のレベルに復した。EPPの作用時間は短く、その作用は可逆的であることが示唆された。EPPは10^<-6>から10^<-14>Mの濃度では培養角膜実質細胞の細胞増殖には全く影響を与えなかった。EPPの細胞増殖抑制作用は角膜上皮細胞に特異的であり、選択的に角膜上皮細胞の増殖を抑制できる可能性が示された。

Epidermal pentapeptide (" は, EPP と slightly す) 1987 に Reichelt ら に よ り マ ウ ス skin よ り separation, refined さ れ た molecular weight 517 の ペ プ タ イ ド で あ り, skin や を suppress esophageal epithelial cells の rights colonization す る こ と が know ら れ て い る. The effects of EPP on the proliferation of <s:1> corneal epithelial cells and parenchymal cells <e:1>, に and える on をラット origin of <s:1> cultured cell lines を use of て検 て検 to investigate <s:1> た. Be 験 に は Sprague wrote - Dawley ラ ッ ト か ら have ら れ た original culture corneal epithelial cell と 継 generation of corneal be stromal cells を い, 5% ウ シ tire where を serum containing む DMEM/Ham 'sF - 12 に 10 ^ 6 > < - か ら 10 ^ < - > 14 M ま で の kind 々 の concentration の EPP と 1 mu M の colchicin eを plus えた culture medium で culture た. After six time に culture cell を boggy acid ア ル コ ー ル で fixed し aceto orcein staining を い, コ ル ヒ チ ン に よ り M phase で stop さ れ た cell division as (c - mitosis) を micro optical 顕 microscopically で measuring す る こ と に よ り, め cells raised colonization frequency を た. Culture corneal epithelium cells で は, polices according to で の cells raised colonization frequency は 31.3 + / 1.5 mm ^ 2 / hour で あ っ た の に し polices, the presence of EPP の で は 10 ^ < - > 8 M の concentration で 18.3 + / - 2.7, 10 ^ < - > 10 M の concentration で 16.2 + / - 1.7 と cells raised colonization low frequency は intentionally に し た. Cells raised colonization frequency は 10 ^ < - > 6 M, あ る い は 10 ^ < - > 12 M the following の EPP concentration で は intentionally の variations change を shown さ ず, all と し て bell shape の dosage against 応 curve を shown し た. EPP を 2 time in their に plus え る と よ り low concentration (10 ^ < - > 12 M) で も を inhibit cell raised colonization す る よ う に な り and EPP を え な に い the culture exchange す る と cells raised colonization は polices according to と equal の レ ベ ル に complex し た. The である である とが とが indication of された that EPP has a short <s:1> action time く and the そ action is <s:1> reversible. EPP は 10 ^ 6 < - > か ら 10 ^ < - > 14 M の concentration で は culture corneal be qualitative cells の rights colonization に は く influence を and all え な か っ た. EPP の cells raised colonization inhibition は corneal epithelium cells に specific で あ り, sentaku に corneal epithelium cells の raised colonization を inhibit で き が る possibility in さ れ た.

项目成果

Yamada M,Mashima Y: "The effect of epidermal pentapeptide on proliferation of rat corneal epithelial cells" Invest Ophthalmol Vis Sci. 37・3(S). 5861 (1996)

山田 M、真岛 Y：“表皮五肽对大鼠角膜上皮细胞增殖的影响” Invest Ophasemol Vis Sci 37・3(S)。