歯周病関連菌由来,ストレス蛋白質の免疫学的研究

牙周病相关细菌衍生的应激蛋白的免疫学研究

• 批准号: 08771579
• 负责人: 松本 壮吉
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771579/
• 关键词: ストレス蛋白質; 70kDa; 若年性歯周炎

我々は,ヒトの70キロダルトン(kDa)熱ショック蛋白質に相同性のある蛋白質の遺伝子をA.actinomycetecomcomitans(A.a.)の染色体より,その遺伝子を含む,2696bpのDNAフラグメントをクローニングし,その全塩基配列を決定した.これらの結果,以下のことが分かった.A.a.の70kDa蛋白質は,大腸菌の70kDa熱ショック蛋白質(DnaK)とアミノ酸で,83%の相同性があることが分かった.また,大腸菌のdna K遺伝子のプロモーター配列と相同の配列が,70kDa蛋白質遺伝子上流に存在した.クローニングしたDNAフラグメントには,70kDa熱ショック蛋白質以外に,40キロダルトン熱ショック蛋白質と相同性の高い蛋白質が,70kDa蛋白質遺伝子の下流に存在することが分かった.また,70kDaと40kDaをコードする遺伝子間に,400bp程のスペースシーケンスがあり,そこには,逆方向繰り返し配列が複数存在した.我々は,本年度70kDa蛋白質及び,40kDa蛋白質が熱ショックにより,発現が増強されることを,本年度,特異抗体を作成して確認したが,このA.a.に特異的な染色体構造が,70kDa及び40kDa蛋白質の発現調節に関与している可能性について,現在検討している.また,70kDa蛋白質の,歯周疾患との関連を検討するため,70kDa蛋白質遺伝子を,発現用プラスミッドに挿入し,大腸菌で,大量に発現させ,その産物をカラムを用いて精製した.それを用い,ELISA法にて,患者血清中に70kDaに対する,抗体が存在することを確認した.今後,歯周病の惹起及び憎悪に,ストレス蛋白質に対する宿主(ヒト)の免疫応答がどのように関与しているかを検討していきたい.

A. actinomycetecomitans (A.a.) is a protein of the same identity as A. actinomycetecomitans (A.a.) The chromosome is divided into two parts, each part contains a DNA fragment, and the 2696bp DNA fragment is divided into two parts. The results showed that the 70kDa protein of A.a. and the 70kDa protein of Escherichia coli (DnaK) were 83% identical. In addition, the DNA K gene of E. coli is aligned with the same sequence, and the 70kDa protein gene is present in the upper stream. The DNA sequence of 70kDa protein, 40 kDa protein,70kDa protein. 70kDa to 40kDa,400bp, reverse orientation, reverse orientation, multiple orientation, and multiple orientation. In this year, the 70kDa protein and the 40kDa protein have increased in heat generation. This year, specific antibodies have been prepared to confirm that the A.a. specific chromosome structure is related to the regulation of the 70kDa protein and the 40kDa protein. The 70 kDa protein was found in large quantities in E. coli and purified in the middle of the production process. ELISA was used to confirm the presence of 70kDa antibodies in the patient's serum. In the future, the occurrence of dental diseases and the development of disease, the protein of the host and the immune response will be discussed.