結核菌のヒストン様蛋白質MDP1による菌の休眼誘導と潜伏感染成立/回避の分子機構

结核分枝杆菌组蛋白样蛋白MDP1诱导细菌眼休息及建立/逃避潜伏感染的分子机制

• 批准号: 17019059
• 负责人: 松本 壮吉
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17019059/
• 关键词: 結核; 抗酸菌; 潜伏感染; 休眠; 三大感染症; 内因性再燃; ゲノム; プロテオミクス

本研究は抗酸菌に特異的な核酸結合性蛋白質MDP1が標的として制御する遺伝子群やMDP1の転写抑制を免れ休眠期でも発現する遺伝子群(休眠維持分子)、MDP1の翻訳後活性に作用する分子群、すなわち定常期から休眠導入期にかけてMDP1を活性化する分子(休眠導入分子)、また休眠期から増殖期にかけてMDP1を不活化する分子(休眠解除分子)を全ゲノムレベルで同定し、結核菌の休眠導入-維持-解除の分子機構を解明することを最終の目的としている。MDP1が制御する遺伝子群の同定MDP1欠失抗酸菌株の蛋白質の二次元電気泳動を行い、野生株のパターンと比較した。MDP1を欠失させることにより、様々な蛋白質が大量に発現されていることが明らかとなった。変化の見られた蛋白質スポットを切り出しトリプシン処理した後、質量分析機にて解析し、MDP1により発現制御される蛋白質群の同定を行った。休眠維持分子探索を目的とした、MDP1大量発現株の作成と解析弱毒牛型結核菌(BCG)のMDP1遺伝子をシャトルベクターpSO246に導入しBCGの形質転換を行うことで、MDP1を大量に発現するBCGを得た。この形質転換体の発育はMDP1によりその発育が顕著に抑制されていた。MDP1大量発現株の蛋白質発現プロファイルを二次元電気泳動法により比較検討し、MDP1の転写抑制を免れ発現する蛋白質群(休眠維持候補分子)の同定を行った。MDP1結合性蛋白質(休眠導入/解除候補分子)の同定MDP1の活性を調節する分子の同定を目的として、MDP1結合性蛋白質の同定を行った。抗MDP1抗体を産生する三種のハイブリドーマ細胞を確立し特異抗体を調整した。この抗体を用いて免疫沈降反応を行い、MDP1と結合する蛋白質が存在することを明らかにした。MDP1結合蛋白質の同定を二次元電気泳動および質量分析と、結核菌ゲノム情報を利用して行った。

In this study, we identified a specific nucleic acid binding protein MDP1 target gene subgroup, a gene subgroup (dormancy maintenance molecule) that inhibits the development of MDP1 during dormancy, a gene subgroup (dormancy maintenance molecule) that acts on MDP1 activity after inversion, a gene subgroup (dormancy introduction molecule) that activates MDP1 during dormancy induction, The final goal is to clarify the molecular mechanism of dormancy introduction-maintenance-release of tuberculosis. MDP1 was found to be able to control the expression of protein in the same strain as MDP1, which was deficient in acid resistance. MDP-1 protein is produced in large quantities. The protein groups of the protein groups were identified by mass spectrometry and MDP1. To explore dormancy maintenance molecules, MDP 1 gene was introduced into BCG and transformed into BCG. The development of this morphological change is inhibited by MDP1. Comparison and identification of protein expression profiles (dormancy maintenance candidate molecules) of MDP1 abundantly expressed strains by two-dimensional electrophoresis MDP-1 binding protein (dormancy introduction/release candidate molecule) regulates molecular identity of MDP-1 activity. Anti-MDP-1 antibodies are produced in three different ways. This antibody is used in immune sedimentation reaction, MDP1 binding protein is not present, and the protein is not present. MDP-1 binding protein identity, two-dimensional electromobility, mass analysis, and tuberculosis information utilization

项目成果

Priming-boosting vaccination with recombinant Mycobacterium bovis bacillus Calmette-Guerin and a nonreplicating vaccinia virus recombinant leads to long-lasting and effective immunity

• DOI: 10.1128/jvi.79.20.12871-12879.2005
• 发表时间: 2005-10-01
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Ami, Y;Izumi, Y;Honda, M
• 通讯作者: Honda, M

Mycobacterial trehalose 6,6′-dimycolate preferentially induces type 1 helper T cell responses through signal transducer and activator of transcription 4 protein

• DOI: 10.1016/j.micpath.2005.03.003
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: MICROBIAL PATHOGENESIS
• 影响因子: 3.8
• 作者: Oiso, R;Fujiwara, N;Kobayashi, K
• 通讯作者: Kobayashi, K

Mycobacterial codon optimization enhances antigen expression and virus-specific immune responses in recombinant Mycobacterium bovis bacille Calmette-Guerin expressing human immunodeficiency virus Type 1 Gag

分枝杆菌密码子优化增强表达人类免疫缺陷病毒 1 型 Gag 的重组牛分枝杆菌卡介苗中的抗原表达和病毒特异性免疫反应

• 发表时间: 2005
• 期刊: J Virol 79・14
• 作者: Matsumoto S;Kanekiyo M
• 通讯作者: Kanekiyo M

結核菌の潜伏感染と内因性再燃の分子機構

结核分枝杆菌潜伏感染和内源性复发的分子机制

• 发表时间: 2005
• 期刊: 化学療法の領域 21
• 作者: Matsumoto S;Kanekiyo M;Ami Y;Oiso R;松本 壮吉
• 通讯作者: 松本 壮吉

DNA augments antigenicity of mycobacterial DNA-binding protein 1 and confers protection against Mycobacterium tuberculosis infection in mice

DNA 增强分枝杆菌 DNA 结合蛋白 1 的抗原性并赋予小鼠抵抗结核分枝杆菌感染的保护作用

• 发表时间: 2005
• 期刊: J Immunol 175・1
• 作者: Matsumoto S