A.actinomycetecomcomitansの熱ショック蛋白質の研究

伴放线放线菌热休克蛋白的研究

• 批准号: 07771620
• 负责人: 松本 壮吉
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771620/
• 关键词: 熱ショック蛋白質; Dna K

我々は,A.actinomycetecomcomitans(A.a.)の染色体より,大腸菌の主要な熱ショック蛋白質,Dna K及び,ヒトの70kDa熱ショック蛋白質に相同性のある蛋白質の遺伝子を含む,2696bpのDNAフラグメントをクローニングし,その全塩基配列を決定した.この,DNAフラグメントには,70kDa熱ショック蛋白質以外に,大腸菌の熱ショック蛋白質Dna Jと相同性の高い蛋白質の,アミノ末端領域の塩基配列が見つかった.それは,70kDa蛋白質遺伝子の,カルボ末端側に存在していた.dna J遺伝子の上流には,プロモーターと考えられる塩基配列がなく,この2つの遺伝子は,一つのオペロンとして転写されるものと考えられた.70kDa蛋白質の遺伝子のアミノ末端が,一部,含まれていなかったため,上流領域の遺伝子のクローニングを試み,それをコードする遺伝子断片を含む,約3kbpのDNAフラグメントをクローニングし,その塩基配列を決定した.その結果,A.a.の70kDa蛋白質は,大腸菌のDna Kとアミノ酸で,83%の相同性があることが分かった.また,大腸菌のdna K遺伝子のプロモーター配列と似た配列が,70kDa蛋白質遺伝子上流に存在し,プロモーター配列と考えられた.それは,大腸菌でも認識される可能性が考えられたため,我々は,70kDa熱ショック蛋白質をコードする遺伝子,およびそのプロモーター配列を含むと考えられるDNA断片を,大腸菌のプラスミッドに挿入し,大腸菌内で発現するかどうかを検討したが,その発現は,検出できなかった.70kDa蛋白質の,歯周疾患との関連を検討するため,70kDa蛋白質を,発現用プラスミッドを用いて,大量に発現させ,その産物をカラムを用いて精製した.現在,患者由来のTリンパ球との反応を,免疫学的手法により検討中である.

A. actinomycetecomitans (A.a.) The chromosome of E. coli is composed of 70kDa protein,Dna K and Dna K. The DNA of E. coli is composed of 2696bp DNA. In addition to 70kDa protein, Escherichia coli protein Dna J has the same identity as high middle protein, and the nucleotide sequence in the terminal domain of DNA is not consistent. 70 kDa protein gene, the end of the protein gene. The DNA fragments of the DNA fragments containing about 3kbp were determined by DNA sequencing. As a result,A.a. and 70kDa protein, Dna K and Dna K of Escherichia coli were 83% identical. In addition, the DNA K gene of Escherichia coli was found in the upper stream of 70kDa protein gene. In this paper, the possibility of recognition of Escherichia coli was examined. We found that the 70 kDa protein was detected by DNA fragment analysis, and the DNA fragment was detected by DNA fragment analysis. The detection of Escherichia coli protein was investigated by DNA fragment analysis. 70kDa protein was found in large quantities, and the product was purified in large quantities. Now, the origin of the patient is T.