口腔癌細胞のPTHrP遺伝子発現に対するras遺伝子活性化の関与

ras基因激活参与口腔癌细胞PTHrP基因表达

• 批准号: 08771619
• 负责人: 阿部 匡聡
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Ohu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771619/
• 关键词: 口腔癌細胞; PTHrP; 活性型ビタミンD; レチノイン酸; VDR; RXR

本研究では、口腔癌細胞HSC-3におけるPTHrP遺伝子発現に対する、1,25-dihydroxyvitamin D_3(1,25(OH)_2D_3)および9-cis-retinoic acid(9cRA)の作用について詳細に検討した。1,25(OH)_2D_3,9cRAは共にHSC-3細胞のPTHrP mRNA発現、HSC-3細胞からのPTHrP分泌を用量依存的に抑制した。更に、1,25(OH)_2D_3,9cRAによるHSC-3細胞のPTHrP遺伝子発現の制御のtime course(12,24,36,48h;12h毎に培地を交換)を検討した。1,25(OH)_2D_3(10^<-7>M),9cRA(10^<-7>M)処理群では、12〜48hの全時間においてコントロール群と比較して、顕著なPTHrP mRNA発現の抑制が認められた。PTHrP分泌は、9cRA(10^<-7>M)処理群では全時間において顕著に抑制されたが、1,25(OH)_2D_3(10^<-7>M)処理群では24hまで顕著に抑制され、36h以降、抑制効果がやや減弱していく傾向が認められた。次に、1,25(OH)_2D_3(10^<-9>M)と9cRA(10^<-8>M)を組み合わせてHSC-3細胞に作用させたところ、1,25(OH)_2D_3,9cRAをそれぞれ単独で作用させた場合に比べ、PTHrP mRNA発現量が有意に低下した。PTHrP分泌量にも同様な傾向が認められた。以上から、PTHrP遺伝子上流にRXR-VDRヘテロダイマーが結合するnegative vitamin D responsive element(nVDRE)の存在が示唆された。更に、RXR-VDRはそれぞれのリガンド結合により複合的活性化を受け、一方のレセプターのみが活性化された場合よりも強くPTHrP遺伝子発現を抑制することが明らかとなった。

In this study, we investigated in detail the effects of 1,25-dihydroxyvitamin D_3(1,25(OH)_2D_3) and 9-cis-retinoic acid(9cRA) on the expression of PTHrP gene in oral cancer cell line HSC-3. 1, 25 (OH)_2D_3, 9cRA inhibited PTHrP mRNA expression and PTHrP secretion in HSC-3 cells in a dose-dependent manner. Furthermore, the time course(12,24,36,48h;12h per culture) of PTHrP gene development in HSC-3 cells was investigated. 1, 25 (OH)_2D_3(10 <-7>^ M),9cRA(10^<-7>M) treatment groups were found to inhibit the expression of PTHrP mRNA during the whole time from 12 h to 48h. PTHrP secretion was inhibited at all times in the 9cRA(10^<-7>M) treatment group and at 24h in the 1,25(OH)_2D_3(10^<-7>M) treatment group. In addition, 1,25(OH)_2D_3(10 <-9>^ M) and 9cRA (10^<-8>M) were combined to act on HSC-3 cells. In addition, 1,25(OH)_2D_3 and 9cRA were combined to act on HSC-3 cells independently. In this case, the expression of PTHrP mRNA was significantly lower than that in HSC-3 cells. The amount of PTHrP secreted was similar to that of PTHrP. The presence of the negative vitamin D responsive element(nVDRE) in the upstream of the PTHrP gene is indicated. In addition, RXR-VDR can be used to inhibit the activation of PTHrP in the presence of a complex.

项目成果

Noboru Horiuchi: "Synthesis of 25-hydroxyvitaminD_3-26,23-lactone but not 24,25-dihydroxyvitaminD_3 from 25-hydroxyvitaminD_3 in opossum kidney cells treated with 1α, 25-dihydroxyvitaminD_3" Hormone and Metabolic Research. 27. 83-89 (1995)

Noboru Horiuchi：“用 1α, 25-二羟基维生素 D_3 在负鼠肾处理的细胞中从 25-羟基维生素 D_3 合成 25-羟基维生素 D_3-26,23-内酯，但不是 24,25-二羟基维生素 D_3”激素和代谢研究 27. 83-89 (1995)。 ）