口腔癌細胞におけるPTHrP遺伝子発現に対する活性型ビタミンDの作用

活化维生素D对口腔癌细胞PTHrP基因表达的影响

• 批准号: 07771705
• 负责人: 阿部 匡聡
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Ohu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771705/
• 关键词: 口腔癌細胞; PTHrP; 活性型ビタミンD; mRNA発現量; PTHrP分泌

口腔癌細胞HSC-3からtotal RNAを抽出し、RT-PCR法により、528bpのhuman PTHrP cDNAを作成し、pT7Blue T-vectorを用いてクローニングした。以後、クリーニングしたhuman PTHrP cDNAをプローブとして、PTHrP mRNA発現量の検索に用いた。本研究では、口腔癌細胞HSC-3におけるPTHrP遺伝子発現に対する、活性型ビタミンDである1,25-dihydroxyvitaminD_3(1,25(OH)_2D_3)の作用について詳細に検討した。1,25(OH)_2D_3は血清無添加の条件下および5%血清存在下でHSC-3細胞のPTHrP mRNA発現、HSC-3細胞からのPTHrP分泌を用量依存的に抑制した。更に、血清無添加の条件下で、1,25(OH)_2D_3によるHSC-3細胞のPTHrP遺伝子発現の制御のtime courseを検討した。1,25(OH)_2D_3(10^<-7>M)処理群では、コントロール群と比較すると、3hからPTHrP mRNA発現量が低下を示し始め、6h以降では顕著なPTHrP mRNA発現の抑制が認められた。PTHrP分泌も1,25(OH)_2D_3(10^<-7>M)処理群ではコントロール群に比べ、3h以降明確な抑制が認められた。以上から、口腔癌細胞HSC-3のPTHrP発現は1,25(OH)_2D_3により転写、翻訳の両レベルで抑制されることが明らかとなった。

Total RNA was extracted from oral cancer cells HSC-3, 528bp human PTHrP cDNA was prepared by RT-PCR, and pT7 Blue T-vector was used. In the future, PTHrP cDNA may be used to detect the expression of PTHrP mRNA. This study examines in detail the role of the active form of VitaminD, 1,25-dihydroxyvitaminD_3(1,25(OH)_2D_3), in the development of PTHrP gene in oral cancer cells HSC-3. 1, 25 (OH)_2D_3 inhibited the expression of PTHrP mRNA and the secretion of PTHrP in HSC-3 cells in the presence of 5% serum. Furthermore, the time course of PTHrP gene expression in HSC-3 cells without serum addition was studied. 1, 25 (OH)_2D_3(10^<-7>M) treatment group was compared with the control group. The expression of PTHrP mRNA decreased at 3h and decreased at 6h. PTHrP secretion was inhibited by 1,25(OH)_2D_3(10^<-7>M) for 3h. The expression of PTHrP in HSC-3 cells was inhibited by 1,25(OH) 2D3.