口腔癌細胞のPTHrP遺伝子発現のレチノイン酸、活性型ビタミンDによる相乗的抑制

视黄酸和活性维生素 D 协同抑制口腔癌细胞中 PTHrP 基因表达

• 批准号: 09771581
• 负责人: 阿部 匡聡
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Ohu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771581/
• 关键词: 口腔癌細胞; PTHrP; プロモーター; 活性型ビタミンD; レチノイン酸; VDR; RXR

PTHrP遺伝子上に存在する3つのプロモーターについて、各プロモーターでの開始による転写産物を特異的に検出するプライマーセットを用いて、RT-PCRを行い、口腔癌細胞HSC-3のPTHrP遺伝子発現における、各プロモーターの使用度を検討した。HSC-3細胞では、3つのプロモーターのうち、最も下流に存在するプロモーター(P3)が高い割合で使われていた。更に、HSC-3細胞に1,25-Dihydroxyvitamin D_3(1,25(OH)_2D_3)(10^<-7>M)、9-cis-retinoic acid(9cRA)(10^<-7>M)を24h作用させたところ、PTHrP遺伝子のP3開始による転写産物が顕著に減少していることが明らかとなった。このことから、HSC-3細胞における、1,25(OH)_2D_3、9cRAによるPTHrP遺伝子発現の抑制には、P3の活性制御が大きく関わっていることが示唆された。また、all-trans-retinoic acidがHSC-3のPTHrP mRNA発現を用量依存的に抑制することが、Northern blot解析により、明らかとなった。次に、HSC-3細胞から調製したゲノムDNAを用いて、PCRにより、PTHrPのP3領域を含む1.3kbの遺伝子フラグメントを増幅した。

PTHrP gene expression in HSC-3 cells was investigated by RT-PCR, detection of PTHrP gene expression in HSC-3 cells, and detection of PTHrP gene expression in HSC-3 cells. HSC-3 cells have high levels of cleavage and cleavage. In addition, HSC-3 cells were treated with 1,25-Dihydroxyvitamin D_3(1,25(OH)_2D_3)(10^<-7>M) and 9-cis-retinoic acid(9cRA)(10^<-7>M) for 24h. PTHrP gene expression was inhibited by PTHrP gene expression in HSC-3 cells, 1,25(OH)_2D_3 cells and 9cRA cells, and P3 activity was inhibited by PTHrP gene expression in HSC-3 cells. Northern blot analysis showed dose-dependent inhibition of PTHrP mRNA expression by all-trans-retinoic acid. In addition, HSC-3 cells were modulated to include DNA, PCR, PTHrP and P3 domains containing 1.3 kb DNA.

项目成果

Masatoshi Abe: "Inhibitory effects of 1,25-dihydroxyvitamin D_3 and 9-cis-retinoic acid on parathyroid hormone-related protein expression by oral cancer cells(HSC-3)" Journal of Endocrinology. 156・2. 349-357 (1998)

阿部正敏：“1,25-二羟基维生素D_3和9-顺式视黄酸对口腔癌细胞（HSC-3）甲状旁腺激素相关蛋白表达的抑制作用”内分泌学杂志156・2（1998年）。 ）

Tetsuya Kawane: "Starvation-induced increase in the parathyroid hormone/PTH-related protein receptor mRNA of bone and kidney in sham-operated and thyroparathyroidectomized rats" European Journal of Endocrinology. 137・3. 273-280 (1997)

Tetsuya Kawane：“假手术和甲状腺甲状旁腺切除大鼠中饥饿诱导的甲状旁腺激素/PTH 相关蛋白受体 mRNA 的增加”欧洲内分泌学杂志 137・3（1997）。