視床下部非シナプス性情報伝達機構の動態-コネクションを中心とした探求-

下丘脑非突触信息传递机制的动力学-以连接为中心的探索-

• 批准号: 08780732
• 负责人: 重吉 康史
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780732/
• 关键词: コネクシン; クローニング; 視床下部; IN SITU HYBRIDIZATION; PCR

新たな神経系特に視床下部に発現するコネクシンを検索するために、ラット視床下部より、mRNAを採取し逆転写酵素にてcDNAを作成した。即ち、J-A Heafligerらの方法に準じてコネクシン分子においてその塩基配列が、よく保存されている膜貫通領域にてdegenerate primerを作成した。PCRにてP32-CTPの存在下において増幅されたフラグメントをポリアクリルアミドゲルに泳動してそこに現れたDNAのbandを切り出した。8本の切り出されたバンドからPCRをおこなってDNAを回収し、プラスミドベクターにサブクローンして、おのおののバンドについて10個のクローンについて塩基配列を解析した。その結果、新規コネクシンのクローンを得た。そのクローンについて現在、in situ hybridization,Northern hybridizationを用いて、神経系での発現に関して検討を加えている。また、現在までに発表されているコネクシンの塩基配列を元にしてprimerを作成し、いくつかのコネクシン分子に関してPCRを用いて部分的なcDNAを得た。それをプラスミドベクターにサブクローンして、in situ hybridizationを行った結果、コネクシン32mRNA、および、コネクシン43mRNAに関しては神経系で広範な発現を認めた。また、これらのmRNAは中枢神経を傷害することによってその発現量が著明に増大することが確認された。コネクシン26mRNA,コネクシン33mRNAに関しては、中枢神経系にて明らかな発現を認めなかった。

In the new system, the enzyme in the lower part of the bed was detected, the enzyme in the lower part of the bed, the enzyme in cDNA, the enzyme in the lower part of the bed, the enzyme in the bottom of the bed. That is to say, the method of Jmura Heafliger synthesis is used to determine the molecular weight, the molecular weight, the base configuration, the preservation of the membrane, the field of degenerate primer, and so on. There is an error message in the PCR message P32-CTP. There is an error message in the DNA band. 8 this book is designed to analyze the distribution of the 10-year-old PCR, the DNA, the customer, the customer, the customer and the customer. The results of the test and the results of the new regulations were successful. Please tell me that you are in the present, that the in situ hybridization,Northern hybridization is in use, and that you are in the system to add information. Now, in the current table, we need to know that the basic configuration is based on the data from the primer, which is made from the cDNA in the PCR section. Please tell me that you need to know that the results of the in situ hybridization operation, the results of the 32mRNA, the 43mRNA, the system, and so on, are different. The central god of the mRNA system is responsible for the safety and safety of the equipment. The 26mRNA, the 33mRNA, the central god, the doctor, the doctor, the boy, the girl, the girl, the boy, the girl, the girl, the

项目成果

Shigeyoshi,Y et al: "Lesion-induced neuronal nitric oxide synthase in Purkinje cells of the rat cerebllar corte" Molecular Brain Research. (In Press).

Shigeyoshi,Y 等人：“大鼠小脑皮质浦肯野细胞中损伤诱导的神经元一氧化氮合酶”分子脑研究。

Eguchi,T et al: "Role of Tachykinin NK-3 receptor in the Paraventricular nucleus in the central antidiuretic action in rats." Brain Research. 743(1-2). 49-55 (1996)

Eguchi,T 等人：“室旁核中的速激肽 NK-3 受体在大鼠中枢抗利尿作用中的作用。”

Tanaka,M et al: "Somatostatin neurons form a distinct peptidergic neuronal group in the rat Suprachiasmatic nucleus : A Double laleling in situ hybridization study" Neurosience Letters. 215(2). 119-122 (1996)

Tanaka,M 等人：“生长抑素神经元在大鼠视交叉上核中形成独特的肽能神经元群：双重原位杂交研究”《神经科学快报》。