動物ヘルペスウイルスの宿主特異性の検討;赤血球凝集活性に注目して

检查动物疱疹病毒的宿主特异性；重点关注血凝活性

• 批准号: 09760271
• 负责人: 前田 健
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760271/
• 关键词: glycoprotein C; glycoprotein D; ネコヘルペスウイルス1型; イヌヘルペスウイルス; ウマヘルペスウイルス1型; ウマヘルペスウイルス4型; 赤血球凝集素; 宿主域; ヘパラン硫酸; gD

本年度は馬に呼吸器疾患を引き起こし馬鼻肺炎の原因ウイルスであるウマヘルペスウイルス1型(EHV-1)及び4型(EHV-4)に注目して研究を行った。両ウイルスは遺伝子レベルで80%近くの相同性を有しており、血清学的にも抗原性が交差することが知られている。しかし、EHV-1は多くの動物種由来の培養細胞に感染するのに対して、EHV-4は馬由来の細胞にしか感染しないことが知られている。両ウイルスのの感染性の違いを検討することにより、動物ヘルペスウイルスの宿主域規定因子の同定が可能になると考え、以下の実験を行った。まず、野外での宿主域の解析を行うためにEHV-1とEHV-4の疫学調査を行った。これまで、抗原性の類似のため両ウイルスの血清学的型別診断が不可能であったが、我々は糖蛋白gGの両ウイルス間で相同性の低い領域に注目し、これらを抗原としたELISAを開発し、両ウイルスの血清学的型別診断を可能にした。これを競走馬を中心とした様々な馬群に応用した結果、EHV-1は冬季の競走馬を中心として、また、EHV-4は年間を通して散発的に発生がみられることが示された(Yasunaga S,Maeda K,et al.1998.J.Vet.Med,Sci.)。これにより感染域の違いが症状及び感染性の違いに影響を与えている可能性が示唆された。加えて、近年、馬鼻肺炎予防のための不活化ワクチンの接種が行われており、従来の診断法ではワクチン誘導抗体と感染抗体の識別が不可能であったが、本ELISAはワクチン誘導抗体に反応しないことが示され、ワクチン接種された馬においても血清疫学調査が可能であることが示された(Yasunaga S,Maeda K,et al.投稿準備中)。両ウイルスの主要糖蛋白であるgB,gC,gD,gGの発現に成功し、現在、その性状を解析中である。また、本申請研究により、ネコヘルペスウイルス1型とイヌヘルペスウイルスの宿主域規定因子は糖蛋白gDである可能性が示され、動物ヘルペスウイルスにおける宿主域に関する総説として報告することができた(Maeda K,et al.1998.J.Vet.Med.Sci.)。

This year は horse に respirator disorders を led き up こ し horse nasal pneumonia の reason ウ イ ル ス で あ る ウ マ ヘ ル ペ ス ウ イ ル ス type 1 (EHV) and び type 4 (EHV - 4) に attention し を line っ て research た. That struck ウ イ ル ス は heritage 伝 son レ ベ ル で nearly 80% く の identity を have し て お り, serological に も antigenicity が job す る こ と が know ら れ て い る. し か し, EHV 1 は く の species origin の culture cell に infection す る の に し seaborne て の cells of the origins, EHV - 4 は horse に し か infection し な い こ と が know ら れ て い る. Struck ウ イ ル ス の の infectious の violations い を beg す 検 る こ と に よ り, animal ヘ ル ペ ス ウ イ ル ス の host domain regulation factor の be が may に な る と え test, the following の be 験 を line っ た. Youdaoplaceholder0, field で, <s:1> host domain <e:1> analysis を line うためにEHV-1とEHV-4 epidemiological investigation を line った. こ れ ま で, antigenicity の similar の た め struck ウ イ ル ス の type serological diagnosis が impossible で あ っ た が, I 々 は glycoprotein gG の struck ウ イ ル ス で phase between same-sex の areas of low い に attention し, こ れ ら を antigen と し た ELISA を open 発 し, struck ウ イ ル ス の type serological diagnosis may を に し た. こ れ を walking horse を center と し た others 々 な horses に 応 with し た results, EHV 1 は winter の walking horse を center と し て, ま を tong し は た, EHV - 4 years of scattered 発 て に 発 raw が み ら れ る こ と が shown さ れ た (Yasunaga S, Maeda K, et al.1998.J. et.Med,Sci. こ れ に よ り infection domain の violations い い が symptoms and infectious の び spare に influence を and え て い が る possibility in stopping さ れ た. Add え て, in recent years, the nasal pneumonia to prevent の た め の inactive ワ ク チ ン の vaccination line が わ れ て お り, 従 の diagnostics で は ワ ク チ ン induced antibodies と infection の recognition が impossible で あ っ た が, the ELISA は ワ ク チ ン に induced antibodies against 応 し な い こ と が shown さ れ, ワ ク チ ン vaccination さ れ た horse に お い て も が can serum epidemiology investigation It can である とが show された(Yasunaga S,Maeda K,et al.) Submission is in preparation. The main glycoproteins であるgB,gC,gD,gG に have been successfully developed に, are currently present, そ are present. The characteristics are を being analyzed である. ま た, this application research に よ り, ネ コ ヘ ル ペ ス ウ イ ル ス type 1 と イ ヌ ヘ ル ペ ス ウ イ ル ス の host domain regulation factor は glycoprotein gD で あ が る possibility in さ れ, animal ヘ ル ペ ス ウ イ ル ス に お け る host domain に masato す る 総 said と し て report す る こ と が で き た (Maeda K, et al.1998.J. et.Med.Sci.

项目成果

Yasunaga S.,Maeda K.,et al.: "Diagnosis and sere-epigootiology of equise herpesuirus type 1 and type 4 in fections in Japan using a type-specific ELISA." J.Uet.Med.Sci.60(10). 1133-1137 (1998)

Yasunaga S.、Maeda K. 等人：“使用类型特异性 ELISA 对日本感染中的马疱疹病毒 1 型和 4 型进行诊断和血清学分析。”

Maeda,K., Xuan,X., Kawaguchi,Y., Ono,M., Yokoyama,N., Fujita,K., Tohya,Y.,and Mikami,T.: "Characterization of canine herpesvirus glycoprotein D (hemagglutinin)." Journal of Veterinary Medical Science. 59. 1003-1009 (1997)

Maeda,K.、Xuan,X.、Kawaguchi,Y.、Ono,M.、Yokoyama,N.、Fujita,K.、Tohya,Y. 和 Mikami,T.：“犬疱疹病毒糖蛋白 D（血凝素）的表征

Maeda,K., Ono,M., Kawaguchi,Y., Okazaki,K., Yokoyama,M., Tohya,Y.,and Mikami,T.: "Adhesion of insect cells expressing the feline herpesvirustype 1 hemagglutinin (gD) to feline cell lines." Journal of Veterinary Medical Science. 59. 217-219 (1997)

Maeda,K.、Ono,M.、Kawaguchi,Y.、Okazaki,K.、Yokoyama,M.、Tohya,Y. 和 Mikami,T.：“表达猫疱疹病毒 1 型血凝素 (gD) 的昆虫细胞的粘附

Maeda,K., Yokoyama,N., Fujita,K., Xuan,X.,and Mikami,T.: "Role of one N-linked oligosaccharide chain on canine herpesvirus gD in its biological activity." Journal of Veterinary Medical Science. 59. 1123-1128 (1997)

Maeda,K.、Yokoyama,N.、Fujita,K.、Xuan,X. 和 Mikami,T.：“一条 N 连接寡糖链对犬疱疹病毒 gD 生物活性的作用。”

Maeda,K., Yokoyama,N., Fujita,K.,and Mikami,T.: "Identification and characterization of the feline herpesvirustype 1 glycoprotein C gene." Virus Genes. 14. 105-109 (1997)

Maeda,K.、Yokoyama,N.、Fujita,K. 和 Mikami,T.：“猫疱疹病毒 1 型糖蛋白 C 基因的鉴定和表征。”