p53C末端部の非特異的DNAに対する機能に及ぼす抗癌剤の効果

抗癌药物对p53 C端抗非特异性DNA功能的影响

• 批准号: 09770433
• 负责人: 西尾 和人
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770433/
• 关键词: p53; DNA修復; Duocarmycin; アニーリング; 抗がん剤; 除去修復; がん抑制遺伝子; minor gloove binder

前年度研究において、p53C末端部蛋白質に対するduocarmycinの影響を検索し、無細胞系においてduocarmycinは非特異的にDNAにアダクトすることにより、C末端蛋白質とDNAの結合を増強し、p53のDNA鎖間移行触媒およびアニーリング触媒作用を阻害することを示した。平成10年度研究においては、このC末端蛋白質が細胞レベルでのduocarmycinの殺細胞効果に影響するか否かを検討するために、野生型および変異型p53を示すヒト肺がん細胞にp53C末端部分のcDNAをプラスミドベクターを用いて導入し、C末蛋白質を過剰発現させた細胞を作成し、duocarmycinを含む各種抗がん剤に対するin vitro感受性を検討した。両細胞株のcDNA導入細胞において、C末端部の過剰発現させた細胞はMockに比してduocarmycin(DU-86,KW-2189)による殺細胞効果に対する感受性が低下する傾向がみとめられた。また他のDNAアルキル化剤であるマイトマイシンCに対しても耐性を示した。シスプラチン、5FU等の他DNA作働薬、およびビンカアルカロイド等の微小管作用薬に対しては、有意な感受性の差違を示さなかった。以上により、p53蛋白質のC末端部分はアルキル化剤等のDNA障害性の抗がん剤によるDNAの傷害に対し、修復の過程を促進する可能性が示唆された。細胞のレベルにおいて、C末端部蛋白質がDNA傷害からの修復あるいはduocarmycinのDNAアダクト量に変化を与えているか否かを、アルカリエリューションを用いて検討したが、同実験系においては有意な差違を検出することはできなかった。p53蛋白質のC末端部は、DNA作働性抗がん剤の感受性に寄与し得ると知れた。

Before the annual study に お い て, p53C terminal part protein に す seaborne る duocarmycin の influence を 検 cable し, no cell line に お い て duocarmycin は nonspecific に DNA に ア ダ ク ト す る こ と に よ り, C terminal protein と DNA の を raised strong し, p53 の DNA migration between lock catalyst お よ び ア ニ Youdaoplaceholder0 リ グ catalytic effect を inhibition of harm する た とを shows た た. Pp.47-53 10 annual study に お い て は, こ の C terminal protein が cells レ ベ ル で の duocarmycin の kill cells working fruit に influence す る か no か を beg す 検 る た め に, wild type お よ び - different p53 を shown す ヒ ト lung が ん cells に p53C end part の cDNA を プ ラ ス ミ ド ベ ク タ ー を with い て import し, at the end of the C Protein を before turning 発 now さ せ を た cells make し, duocarmycin を containing む various resistance が ん tonic に す seaborne る the in vitro susceptibility を beg し 検 た. Struck cell lines の cDNA import cell に お い て, C terminal part の before turning 発 now さ せ た cells は Mock に than し て duocarmycin (DU - 86 KW - 2189) に よ る kill cells working fruit に す seaborne る sensitivity low が す る tendency が み と め ら れ た. ま た he の DNA ア ル キ ル the tonic で あ る マ イ ト マ イ シ ン C に し seaborne て も patience を shown し た. シ ス プ ラ チ ン and 5 fu の his DNA 働 薬, お よ び ビ ン カ ア ル カ ロ イ ド role の tiny tube 薬 に し seaborne て は, intentionally な susceptibility の を shows poor spare さ な か っ た. Above に よ り, p53 protein の C terminal part は ア ル キ ル tonic and other の DNA handicap of sexual の resistance が ん tonic に よ る の DNA damage に し seaborne, repair process の を promote す が る possibility in stopping さ れ た. Cell の レ ベ ル に お い て, C terminal part protein が DNA damage か ら の repair あ る い は duocarmycin の DNA ア ダ ク ト quantity に variations change with え を て い る か no か を, ア ル カ リ エ リ ュ ー シ ョ ン を with い て beg し 検 た が, with be 験 department に お い て は intentionally な poor violations を 検 out す る こ と は で き な か っ た. The <s:1> terminal C of p53 protein がん and DNA act as an active antagonist がん sensitivity に is attached to the ると knowledge れた of <s:1>.

项目成果

Yokote,H.,Nishio,K.,et al.: "The C-terminal domain of p53 catalyzes DNA-renaturation and strand exchange toward annealing between intact ssDNAs and toward eliminating damaged ssDNA from duplex formation through preferential recognition of damaged DNA by a

Yokote, H., Nishio, K., et al.：“p53 的 C 末端结构域催化 DNA 复性和链交换，从而实现完整 ssDNA 之间的退火，并通过优先识别受损 DNA，从双链体形成中消除受损 ssDNA。