ホスファチジルコリン特異的ホスホリパーゼC(PC-PLC)阻害による癌細胞増殖抑制に関する検討

通过抑制磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C抑制癌细胞生长的研究(PC-PLC)

基本信息

项目摘要

ヒトおよび肺癌細胞培養株におけるホスファチジルコリン特異的ホスホリパーゼC(PC-PLC)に対する作用と増殖抑制との関わりについての検討を行った。細胞増殖抑制に対するPC-PLCの作用点を明らかにする目的でPC-PLC特異的阻害剤であるD609の細胞増殖抑制をMTTアッセイで検討した。(1)各種ヒト肺癌培養細胞株(PC-9,PC-14,H69等)に対するPC-PLC特異的阻害剤であるD609は中等度の細胞増殖抑制効果をみとめた(IC_<50>=^〜25μg/ml)。(2)遺伝子移入細胞での検討:H-ras遺伝子、erb-2遺伝子導入により形質転換したfibroblast NIH3T3細胞においては親株と比べてD609の細胞増殖抑制に差をみとめなかった。TNF遺伝子移入肺癌細胞はD609の細胞増殖抑制に対し、親株に比し感受性の増強をみとめた。IL-2導入肺癌細胞においては差をみとめなかった。(3)そこでPC-PLC活性を[^<14>C]ホスファチジルコリンを基質としてジアシルグリセロールの産生を測定することにより解析した。IC_<50>=0.25^〜50μg/mlの濃度のD609にTNF遺伝子移入肺癌細胞およびを24時間接触させた後、細胞のPC-PLC活性を測定した。D609は濃度依存的にPC-PLC活性を抑制した。以上によりPC-PLCによる癌細胞の増殖阻害にTNFの細胞内情報伝達機構が関与する可能性が示唆された。
The effect of PC-PLC on proliferation inhibition of lung cancer cell culture was studied. Cell proliferation inhibition is the target of PC-PLC specific inhibition. Cell proliferation inhibition is the target of MTT. (1)PC-PLC specific inhibitors against various lung cancer cell culture lines (PC-9,PC-14,H69, etc.) were found in D609, which had moderate inhibitory effects on cell proliferation (IC_<50>=^~ 25μg/ml). (2)Analysis of gene transfer into cells: The introduction of H-ras gene and erb-2 gene into fibroblast NIH 3T3 cells resulted in a significant change in the shape and quality of the cells, and the inhibition of cell proliferation in the parent strain was significantly different from that in D609. TNF gene transfer into lung cancer cells D609 cell proliferation inhibition, parental plant sensitivity enhancement IL-2 is introduced into lung cancer cells. (3)The PC-PLC activity is determined by the analysis of the basic parameters of the PC-PLC production process<14>. IC_0 <50>=0.25 μg/ml ~ 50μg/ml. TNF gene was transfected into lung cancer cells and PC-PLC activity was measured after 24 hours of exposure. D609 inhibits concentration-dependent PC-PLC activity. The above results indicate the possibility of interaction between PC-PLC and TNF signaling mechanisms in cancer cell proliferation inhibition.

项目成果

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