ホスファチジルコリン特異的ホスホリパーゼC(PC-PLC)阻害による癌細胞増殖抑制に関する検討

通过抑制磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C抑制癌细胞生长的研究（PC-PLC）

• 批准号: 06857041
• 负责人: 西尾 和人
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 1995
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06857041/
• 关键词: ホスホリパーゼC; ホスファチジルコリン; TNF; D609; 肺癌; 遺伝子移入; 細胞増殖

ヒトおよび肺癌細胞培養株におけるホスファチジルコリン特異的ホスホリパーゼC(PC-PLC)に対する作用と増殖抑制との関わりについての検討を行った。細胞増殖抑制に対するPC-PLCの作用点を明らかにする目的でPC-PLC特異的阻害剤であるD609の細胞増殖抑制をMTTアッセイで検討した。(1)各種ヒト肺癌培養細胞株(PC-9,PC-14,H69等)に対するPC-PLC特異的阻害剤であるD609は中等度の細胞増殖抑制効果をみとめた(IC_<50>=^〜25μg/ml)。(2)遺伝子移入細胞での検討:H-ras遺伝子、erb-2遺伝子導入により形質転換したfibroblast NIH3T3細胞においては親株と比べてD609の細胞増殖抑制に差をみとめなかった。TNF遺伝子移入肺癌細胞はD609の細胞増殖抑制に対し、親株に比し感受性の増強をみとめた。IL-2導入肺癌細胞においては差をみとめなかった。(3)そこでPC-PLC活性を[^<14>C]ホスファチジルコリンを基質としてジアシルグリセロールの産生を測定することにより解析した。IC_<50>=0.25^〜50μg/mlの濃度のD609にTNF遺伝子移入肺癌細胞およびを24時間接触させた後、細胞のPC-PLC活性を測定した。D609は濃度依存的にPC-PLC活性を抑制した。以上によりPC-PLCによる癌細胞の増殖阻害にTNFの細胞内情報伝達機構が関与する可能性が示唆された。

ヒトおよび lung cancer cell culture strain におけるホスファチジルコリンspecific ホスホリパーゼC(PC-PLC) has the function of suppressing proliferation and inhibiting growth. Cell Proliferation Inhibition System PC-PLC's point of action is a PC-PLC-specific inhibitor of D609's cell proliferation inhibition function. (1) Various lung cancer cultured cell lines (PC-9, PC-14, H69, etc.) and PC-PLC-specific inhibitor D609 have moderate cell proliferation inhibitory effects (IC_<50>=^~25μg/ml). (2) Transmigration of DNA into cells: H-ras DNA and erb-2 DNA into fibroblast The parent strain of NIH3T3 cells has a better inhibitory effect on cell proliferation than the parent strain of NIH3T3 D609. When the TNF gene was transplanted into lung cancer cells, cell proliferation was inhibited in D609 cells, and sensitivity was enhanced compared to the parent strain. IL-2 is introduced into lung cancer cells. (3)そこでPC-PLC active [^<14>C]ホスファチジルコリンをMatrix としてジアシルグリセロールの成をdetermination することによりanalytic した. IC_<50>=0.25^~50μg/ml concentration of D609 TNF residues was transplanted into lung cancer cells and after 24 hours of exposure, the PC-PLC activity of the cells was measured. D609 also inhibits PC-PLC activity in a concentration-dependent manner. The above-mentioned PC-PLC shows the possibility of inhibiting the growth of cancer cells and the intracellular information transmission mechanism of TNF.