Rett症候群の遺伝子解析

Rett综合征的遗传分析

• 批准号: 09770563
• 负责人: 山形 崇倫
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770563/
• 关键词: Rett症候群; 遺伝子解析; RNA arbitrarily primed PCR法

Rett症候群と正常者で発現が異なっている遺伝子を検出することにより、Rett症候群の責任遺伝子あるいは病態に関連した遺伝子が解明されるであろうとの推定により、Rett症候群と正常者とで、RNA arbitrarily primed PCR法を行い、発現が異なる遺伝子のクローニングを行った。Rett症候群患者4人および正常コントロールのリンパ球よりRNAを抽出し、非特異的な短いプライマーを用いてRT-PCRを施行し、電気泳動した。その結果、Rett症候群と正常で発現が異なる遺伝子が多数検出された。そのうちの10個のバンドのゲルを切り出して、PCRプロダクトを抽出し、それを鋳型として再度PCRした。そのPCR産物をTAクローニング法でプラスミドベクターに組み込み、大腸菌に形質転換し、クローニングした。そのプラスミドクローンの塩基配列を決定した。しかし、これらのクローン全てにおいて、cDNAとして興味ある配列を有するものはなかった。また、これらのクローンの遠位配列ををもとに、RT-PCR法にて再度Rett症候群と正常者での発現を確認したが、Rett症候群と正常との間で、一定のパターンでの発現は確認されず、Rett症候群の責任遺伝子である可能性は否定的であった。

Rett syndrome and normal cases are found to be different from each other. The responsible genes of Rett syndrome are pathologically related to each other. The presumptive genes of Rett syndrome and normal cases are detected by RNA arbitrarily primed PCR. Four patients with Rett syndrome were treated with reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and normal controls. The results, Rett syndrome and normal development are different, and most of the children are detected. All 10 of them were cut off, PCR was extracted, and PCR was re-typed. The PCR products were selected from the group consisting of Escherichia coli, Escherichia coli and Escherichia coli. The basic configuration of the system is determined. All of the above are related to cDNA sequences. The detection of Rett syndrome and normal by RT-PCR is confirmed. The detection of certain Rett syndrome and normal is confirmed. The possibility of Rett syndrome is denied.