中枢刺激薬による逆耐性形成の分子機構の解析

中枢兴奋剂反向耐受形成的分子机制分析

• 批准号: 09770771
• 负责人: 梶井 靖
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: National Center of Neurology and Psychiatry
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770771/
• 关键词: 覚醒剤; メタンフェタミン; mRNA; 逆耐性現象; アンチセンス法; 大脳皮質; 行動感作; 生後発達; 脳; 遺伝子クローニング; 逆耐性

メタンフェタミン(MAP)、コカイン等の中枢刺激薬による行動感作形成には新しい遺伝情報の発現が必要であり、また、ラットにおいては生後3週以降に認められるようになる現象である。mrtlは、この生後3週以降にneocortexにおける発現がMAP投与によって増強される新規遺伝子群の一つとして昨年度単離した。本年度はこのmrtlの発現誘導について詳細に解析すると共に、mrtl特異的アンチセンスオノゴヌクレオチドの行動感作形成への影響を検討した。mrtlには少なくとも4つのスプライシングヴァリアントが存在し、C末端の構造が異なる2つのタンパク質、Mrtl a およひMrtl b をコードすると推定されたが、MAPに応答するのは主としてMrtl b をコードするヴァノアントB/Dであり、投与後1時間をピークとして一過性に発現増強が記められた。この誘導性ヴァリアントはMAP同様に行動感作を誘導するコカインにも有意に応答したが、行動感作を誘導しないD1受容体アンタゴニストであるSCH23390には応答をしなかった。一方、ヴァリアントA/Cは脳の各部位および他の一般臓器に定常的に広く発現することが示された。ラット脳で発現するMrtl蛋白質を検出するために、推定されるN末端領域の15アミノ酸残基(5-19)からなるペプチドをKLHに結合させて抗原とし、ウサギを免疫してポリクローナル抗体を得た。Western blotを解析した結果、cDNA配列から推定される分子量(61kDa)より7kDaほど大きい68kDaの単一バンドを検出した。mrtl翻訳開始点を含む配列に特異的なアンチセンスSオリゴヌクレオチドを脳室内に導入した結果、配列特異的に行動感作の形成が抑制された。以上のデータより、mrtlが行動感作形成に至る遺伝子発現カスケードに関与する可能性が示唆された。

メ タ ン フ ェ タ ミ ン (MAP), コ カ イ ン の central stimulus such as 薬 に よ る action sense for forming に は new し い heritage 伝 intelligence の 発 が now necessary で あ り, ま た, ラ ッ ト に お い て は born in 3 weeks after に recognize め ら れ る よ う に な る phenomenon で あ る. MRTL は, こ の born in 3 weeks after に neocortex に お け る 発 が MAP now cast with に よ っ て raised strong さ れ る new rules but a つ 伝 subgroup の と し annual 単 て yesterday from し た. This year は こ の MRTL の 発 now induced に つ い て detailed analytical す に る と に, MRTL specific ア ン チ セ ン ス オ ノ ゴ ヌ ク レ オ チ ド の action sense for forming へ の influence を beg し 検 た. Less MRTL に は な く と も 4 つ の ス プ ラ イ シ ン グ ヴ ァ リ ア ン ト が exist し が different structures, C terminal の な る 2 つ の タ ン パ ク qualitative, MRTL a お よ ひ MRTL b を コ ー ド す る と presumption さ れ た が, MAP に 応 answer す る の は main と し て MRTL b を コ ー ド す る ヴ ァ ノ ア ン ト B/D で あ り, cast and after 1 time を ピ ー ク と し て transient に 発 now raised strong が remember め ら れ た. こ の induced ヴ ァ リ ア ン ト は MAP with others に action sense for を induced す る コ カ イ ン に も intentionally に 応 answer し た が, action for を induced し な い D1 by let body ア ン タ ゴ ニ ス ト で あ る SCH23390 に は 応 answer を し な か っ た. Party, ヴ ァ リ ア ン ト A/C は 脳 の parts お よ び he の general viscera に time-invariant に hiroo く 発 now す る こ と が shown さ れ た. ラ ッ ト 脳 で 発 now す る Mrtl protein を 検 out す る た め に presumption, さ れ る の 15 N terminal field ア ミ ノ acid residues (5-19) か ら な る ペ プ チ ド を KLH に combining さ せ て antigen と し, ウ サ ギ を immune し て ポ リ ク ロ ー ナ た を ル antibody. Western blot を parsing し た results, cDNA match column か ら presumption さ れ る molecular weight (61 kda) よ り 7 kda ほ ど big き い 68 kda の 単 a バ ン ド を 検 out し た. MRTL 訳 start point を containing む match column に specific な ア ン チ セ ン ス S オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド を 脳 indoor に import し た results, match column specific に action feeling の form が inhibit さ れ た. Above の デ ー タ よ り, MRTL が actions に sense as to る heritage 伝 son 発 now カ ス ケ ー ド に masato and す が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Shigenobu Toda,et al.: "A gene for Pnut/Septin-like protein alternatively epressed in adult rat brain." Neuroscience Research. suppl22. S129 (1998)

Shigenobu Toda 等人：“Pnut/Septin 样蛋白基因在成年大鼠大脑中交替表达。”

梶井 靖: "脳における新しい情報伝達系の可能性とストレス応答." Bio Clinica. 12. 908-912 (1997)

Yasushi Kajii：“大脑中新的信息传输系统和压力反应的可能性。”12. 908-912 (1997)。

西川 徹,他: "分裂病の成因は薬理・生化学的アプローチから解明されるか." 精神科治療学. 12. 617-623 (1997)

Toru Nishikawa 等人：“可以通过药理学和生化方法阐明精神分裂症的病因吗？”精神治疗学。12. 617-623 (1997)

Takanori HASHIMOTO: "Tissue plasminogen activator mRNA induction after methamphetamine treatment in rat brain." Neuroscience Research. sup.20. S231 (1996)

Takanori HASHIMOTO：“大鼠大脑中甲基苯丙胺治疗后组织纤溶酶原激活剂 mRNA 的诱导。”

平岡秀一: "精神分裂病の動物モデル" ブレインサイエンス. 8. 399-407 (1997)

Shuichi Hiraoka：“精神分裂症的动物模型”《脑科学》8. 399-407 (1997)。