ヒト卵巣における性ステロイド産生細胞の分化

人卵巢中性类固醇生成细胞的分化

• 批准号: 09771287
• 负责人: 大場 隆
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771287/
• 关键词: 卵巣表層上皮; 顆粒膜細胞; SCP2; StAR; ステロイドホルモン; SV-40ラージT抗源

これまでに我々は、ヒト卵巣表層上皮細胞には、sterol carrier protein 2(SCP2)、steroidogenic acute regulatory protein(StAR)、エストロゲンレセプターの遺伝子が発現しており、ステロイド産生細胞としての潜在的な能力を有していることを明らかにしていた。今回は、卵巣表層上皮細胞が顆粒膜細胞に分化するとの仮説を検証するため、エストロゲン合成に必須の酵素であるアロマターゼに着目し、ヒト卵巣表層上皮細胞におけるアロマターゼ発現の調節について検討した。ヒト卵巣表層上皮細胞を無血清培地で18時間インキュベートした後に、8-Br-cAMP(1mM)、ホルボールエステル(100pg/ml)、あるいはエストラジオール(10ng/ml)存在下で24時間培養した。回収した細胞からRNAを抽出して、ヒト卵巣のアロマターゼ遺伝子に特異的なプライマーを用いてRT-PCRを行った。刺激に対するコントロールとしては0.01%のDMSOを添加した。またRT-PCRの条件は内因性のヒトp-グロビン遺伝子の発現で比較した。ヒト卵巣表層上皮細胞にはアロマターゼのmRNAは発現していなかった。8-Br-cAMP、ホルボールエステルやエストラジオールによる刺激を行っても、アロマターゼの発現は認められなかった。さらに、SCP2、エストロゲンレセプターについて同様に検討すると、いずれも刺激による発現の変化はみられなかった。一方、ヒト卵巣の間質由来の培養細胞では、ステロイドホルモンは産生していなかったがアロマターゼおよびSCP2の発現が認められた。以上の結果より、卵巣表層上皮細胞が顆粒膜細胞に分化し、ステロイドホルモン産生能を獲得するという仮説を支持する証拠は得られず、SCP2やエストロゲンレセプターは他の細胞機能に関与していることが示唆された。

Youdaoplaceholder3 れまでに I 々 々, ヒト oocyte surface epithelial cells に, sterol carrier protein 2(SCP2), steroidogenic acute regulatory Protein (StAR), エ ス ト ロ ゲ ン レ セ プ タ ー の posthumous son 伝 が 発 now し て お り, ス テ ロ イ ド cells と し て の potential な を power し て い る こ と を Ming ら か に し て い た. This は, egg 巣 surface epithelial membrane cells に す が particles る と の 仮 said を 検 card す る た め, エ ス ト ロ ゲ に must の ン synthesis enzyme で あ る ア ロ マ タ ー ゼ に mesh し, ヒ ト eggs 巣 surface epithelial cells に お け る ア ロ マ タ ー ゼ 発 is の regulating に つ い て beg し 検 た. ヒ ト eggs 巣 surface epithelial cells in serum-free culture を で 18 time イ ン キ ュ ベ ー ト し た に, 8 - Br - after cAMP (1 mm), ホ ル ボ ー ル エ ス テ ル (100 pg/ml), あ る い は エ ス ト ラ ジ オ ー ル (10 ng/ml) in the presence of で 24 time cultivating し た. を drew back 収 し た cells か ら RNA し て, ヒ ト eggs 巣 の ア ロ マ タ ー ゼ posthumous son 伝 に specific な プ ラ イ マ ー を with い を line っ て RT - PCR た. Stimulation: に against するコ トロ トロ に と と と て て を 0.01% <s:1> DMSOを add を た. Youdaoplaceholder0 RT-PCR <s:1> conditions また endogenous <s:1> ヒトp-グロビ <s:1> 伝 offspring <e:1> occurrence で comparison <s:1> た た ヒ ト eggs 巣 surface epithelial cells に は ア ロ マ タ ー ゼ の mRNA は 発 now し て い な か っ た. 8 - Br - cAMP, ホ ル ボ ー ル エ ス テ ル や エ ス ト ラ ジ オ ー ル に よ る stimulus を line っ て も, ア ロ マ タ ー ゼ の 発 は now recognize め ら れ な か っ た. さ ら に, SCP2, エ ス ト ロ ゲ ン レ セ プ タ ー に つ い て with others に beg す 検 る と, い ず れ も stimulus に よ る 発 の now - the は み ら れ な か っ た. One party, ヒ ト eggs 巣 の mesenchymal origin の culture cell で は, ス テ ロ イ ド ホ ル モ ン は produce し て い な か っ た が ア ロ マ タ ー ゼ お よ び SCP2 の 発 が now recognize め ら れ た. の above results よ り, egg 巣 surface epithelial cell membrane cells に し が particles, ス テ ロ イ ド ホ ル モ ン produce can get す を る と い う 仮 says を support す る card 拠 は have ら れ ず, SCP2 や エ ス ト ロ ゲ ン レ セ プ タ ー は he の cell function に masato and し て い る こ と が in stopping さ れ た.