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ポジショナルクリーニングによる婦人科癌、習慣流産に関与する遺伝子の単離

通过体位清洗分离妇科癌症和习惯性流产相关基因

基本信息

批准号：
09771311
负责人：
岡本愛光
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771311/
关键词：
ポジショナルクローニング染色体異常卵巣癌流産習慣流産 FISH

项目摘要

1。インフォームドコンセントを得た58例の婦人科癌患者の末梢リンパ球染色体解析を行い、3例の染色体異常を検出した。その内訳はそれぞれ46,XX,inv(9)(p12q13)1例、46,XX,45,X,47,XXXのモザイク2例であった。2。反復流産既往がある46,XX,inv(9)(p12q13)の症例のリンバ球はEBウイルスにより不活化、細胞株化し、次のFISH解析に供した。3。 9p12領域およびその周囲のYACクローン15種を入手し、DNAを調整し、2の細胞株でFISHを行った。正常アレルに対し逆位を起こしているアレルでのspilit signalを検索し、5種のYACクローンがspilit様signalを示した。しかしながら、セントロメア領域の繰り返し配列のため正常のアレルにも複数のsignalが検出されたために、さらに5種のYACクローンの5'側fragmentをそれぞれ単離し再度FISHを行った。その結果、2種のYACクローンがspilitsignalを示した。同時に15種のYACクローンのcontigも確認した。4。 2種のYACクローンの領域およびその周辺には既に単離されている遺伝子、BAG1,SHB1,PGM5があり、卵巣癌細胞株でmRNAの発現異常をRT-PCRにより検索したが、明らかな発現異常は認められなかった。5。 spilit signalを示した2種のYACクローンをcosmidにsubcloningし、FISHを行い、6種のcosmidクローンがspilit signalを示し、そのcosmidクローンのcontigを行なった。その結果、breakpointは約60kbに狭められた。

1。Chromosome analysis was performed in 58 female cancer patients, and chromosomal abnormalities were detected in 3 patients. 46,XX,inv(9)(p12q13)1 case, 46,XX,45,X,47,XXX 2 cases. 2。Recurrent abortion cases were analyzed by FISH analysis, cell strain development and inactivation. 3。9p12 domain, 15 species of YAC, DNA regulation, 2 cell lines, FISH The normal position is reversed, and the five kinds of YAC signals are displayed. The 5'side fragment of 5 kinds of YAC can be detected by FISH. The result is that there are two kinds of YAC and two kinds of spilitsignal. At the same time, 15 kinds of YAC were confirmed. 4。Two kinds of YAC were detected by RT-PCR, BAG1,SHB1,PGM5 and ovarian cancer cell lines. 5。Two kinds of YAC signals are indicated as cosmoid subcloning, FISH signals are indicated as cosmoid signals, and all cosmoid signals are indicated as contig signals. The result, breakpoint, is about 60kb.