光感受性機能領域ペプチドを用いた興奮収縮連関におけるシグナル伝達領域の同定

使用光敏功能区肽识别兴奋-收缩耦合中的信号转导区域

• 批准号: 09771988
• 负责人: 國安 明彦
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771988/
• 关键词: 興奮収縮連関; 光アフィニティラベル法; Ca放出チャンネル; 骨格筋; 光アフィニティラベル; 筋収縮; カルシウムチャンネル; ペプチド合成

骨格筋興奮収縮連関・機能共役領域である骨格筋DHP受容体II-IIIループの領域に光ラベル基を導入した光感受性機能領域ペプチドの合成検討を行った。昨年は目的ペプチドN末端にCysを導入し、光感受性試薬マレイミド型ベンゾフェノンをカップリングしようとしたが、精製がうまくいかなかった。そこで当初の計画に立ち戻り、Fmoc-Bpaを用いてペプチド内に光ラベル基を導入することにした。こちらは合成と精製が順調に進み、解析に供する目処がついた。また、光ラベルペプチドを効率良く精製し、かつ微量で解析できる一般的手法の開発を行い、ほぼ確立した(投稿準備中)。なお、ごく最近、遺伝子工学的解析によって骨格筋リアノジン受容体上のDHP受容体相互作用部位の同定について、2つの研究グループから報告がなされた。したがって、有機化学・生化学的手法を駆使する本研究の結果を、遺伝子での結果と対比させることによって、目的とする相互作用部位についての総合的な解釈ができると考えている一方、昨年に引き続き、先に我々が見いだした骨格筋リアノジン受容体を特異的に活性化する新規サソリ毒について、モジュレーター分子を介する活性化機構のより詳細な解析を行った。その結果、このモジュレータ分子が、リアノジン受容体と複合体を形成していると報告されているトリアジンである可能性が極めて高いことが明らかとなった。さらに、東北大・薬・大泉教授らのとの共同研究で、このトリアジンが骨格筋リアノジン受容体を抑制的に調節していること(Biochemistry,1998)を明らかにし、この結果を踏まえて検討した結果、本サソリ毒は、このトリアジンによるチャンネル抑制効果を解除する(Biochem.J.,印刷中)という興味深い結果を得た。

DHP receptor II-III domain is introduced into DHP receptor functional domain. Last year, the N-terminal Cys were introduced, and the photosensitivity test was carried out. This is the first time that the project has been established, and Fmoc-Bpa has been introduced into the project. This is the first time I've ever seen a woman. In the process of developing and establishing general techniques, the efficiency of light selection is well refined, microanalysis is performed, and submission preparation is in progress. The analysis of DHP receptor interaction sites on the receptor is based on the analysis of recent and genetic engineering. The results of this study were compared with those of organic chemistry and biochemistry, and the interaction sites were studied. The results of this study were compared with those of organic chemistry and biochemistry. The results of this study were compared with those of organic chemistry and biochemistry. The results of this study were compared with those of organic chemistry and biochemistry. Detailed analysis of the activation mechanism of the molecule As a result, the probability of the formation of the receptor and the complex is extremely high. In the joint study of Professor Oizumi and Tohoku University, the regulation of receptor inhibition of bone marrow degeneration (Biochemistry,1998) was clarified. The results of this study were discussed. The inhibition effect of receptor inhibition of bone marrow degeneration was relieved (Biochem.J.,1998). In printing)

项目成果

"Caチャンネルの分子構造と機能相関" 心臓. 30. 71-76 (1998)

“Ca 通道的分子结构和功能关系” Cardiac 30. 71-76 (1998)

M.Ohkura,A.Kuniyasu,H.Nakayama and Y.Ohizumi.et al.: "Dual reguation of the skeletal muscle ryanodine receptor by triadin and calsequestrin" Biochemistry. 37. 12987-12993 (1998)

M.Ohkura、A.Kuniyasu、H.Nakayama 和 Y.Ohizumi.et al.：“三联蛋白和 calsequestrin 对骨骼肌兰尼碱受体的双重调节”生物化学。

Ii,N.,A.Kuniyasu,and H.Nakayama et al.: "Photochemical localization of the semotiadil binding region within the cardiac Ca^<2+> channel alphal subunit.Comparison with the skeletal muscle counterpart." FEBS Letter. 441. 83-87 (1998)

Ii，N.，A.Kuniyasu 和 H.Nakayama 等人：“心脏 Ca^2 通道 α 亚基内 semotiadil 结合区域的光化学定位。与骨骼肌对应物的比较。”

A.Kuniyasu,T.shibano,H.Nakayama.et al.: "Photochemical identfication of transmembrane segment IVS6 as the binding region of semotiadil,a new modulator of the L-type voltage-dependent Ca^<2+> channel." Journal of Biological Chemistry. 273. 4635-4641 (1998)

A.Kuniyasu、T.shibano、H.Nakayama.et al.：“光化学鉴定跨膜片段 IVS6 作为 semotiadil 的结合区域，semotiadil 是 L 型电压依赖性 Ca^2 通道的新调节剂。”

國安明彦、中山仁: "Caチャンネルの分子構造と機能相関" 心臓. 30. 71-76 (1998)

Akihiko Kuniyasu、Hitoshi Nakayama：“Ca 通道的分子结构和功能关系” Cardiac 30. 71-76 (1998)