細胞選択的プロティン導入による共培養系細胞機能制御システムの構築

通过细胞选择性蛋白导入构建共培养细胞功能控制系统

• 批准号: 20034045
• 负责人: 國安 明彦
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20034045/
• 关键词: 細胞・組織; 生体機能利用; 蛋白質; バイオテクノロジー

プロティンセラピーを志向した機能性分子・タンパク質の細胞選択的細胞内導入を目的とし,1)ファージディスプレイ法で同定したミクログリア結合ペプチドの細胞内物質導入能と初代ラット脳スライス培養での特異的取込みについて観察を行った。1. 選択的結合ペプチドによるミクログリア選択的物質導入の検証ミクログリア結合配列Cys-Ser-Trp-Val-Gly-Val-Ser-Leu-CysにGly-Glyリンカーを介して細胞死誘導を結合させたキメラペプチド,およびN末に蛍光試薬FAMを付加したペプチドを固相合成した。これらをミクログリア,アストロサイト,ニューロンの各培養細胞株に添加し,細胞死誘導能と蛍光観察により細胞内に取り込まれているか調べた。その結果,ミクログリア細胞株で顕著な細胞死と蛍光ペプチドの取込みが観察された。また,本ペプチドはマクロピノサイトーシス機構で取込まれていることがわかった。さらに本ペプチドと赤色蛍光タンパク質およびストレプトアビジンとコンジュゲートを作製して細胞内取込みを見たところ,効率よく取込まれていることが確認された。2. 初代ラット脳スライス培養系でのミクログリア選択的細胞内導入新生ラット脳より調製した初代スライス培養を用いて蛍光ペプチドのミクログリアへの取込みを観察した。その結果,ミクログリアマーカーIba1陽性細胞に限局して,蛍光ペプチドが取込まれていることがわかった。よって,本ペプチドはin vivoにおいてもミクログリア選択的に物質導入可能であることが確認された。本研究により,細胞内物質導入が可能なペプチドを得る上でファージディスプレイ法は有効な手法であり,得られたペプチドにより標的細胞選択的に物質導入と細胞機能制御が可能であることが示された。これらの成果はプロティンセラピー実現に向けた有用な基礎知見の一つとなりうる。

The aim of the intracellular introduction of functional molecules into cells is to detect the intracellular substances in cells cultured in vitro. 1. Selected binding species are selected from the group consisting of Cys-Ser-Trp-Gly-Val-Ser-Leu-Cys, Gly-Gly-Cys, and Cys-Ser-Trp-Val-Ser-Leu-Cys. In addition, cell death can be induced in cultured cell lines by light detection. As a result, the cell line was isolated and the cell line was isolated. This is the first time I've ever seen a woman. This is the first time I've ever seen a woman. 2. The primary culture system is used to detect the selection of new growth factors by introducing new growth factors into selected cells As a result, the number of positive cells was limited, and the number of positive cells was reduced. This article is about the possibility of substance introduction in vivo. In this study, the introduction of intracellular substances into the cells was possible. The results of this study are useful for understanding basic knowledge.

项目成果

Microglia targeting peptide ligands with cell-penetrating properties

小胶质细胞靶向具有细胞穿透特性的肽配体

• 发表时间: 2008
• 作者: Akhiko Kuniyasu;et.al.
• 通讯作者: et.al.

白血病細胞株における Notch 1由来ペプチド断片による非アポトーシス性細胞死誘導

Notch 1 衍生肽片段在白血病细胞系中诱导非凋亡细胞死亡

• 发表时间: 2009
• 作者: 國安明彦;佐藤直哉;高橋俊輔;杉本幸彦;西村真平;中山仁
• 通讯作者: 中山仁

Oral administration of synthetic retinoid Am80(Tamibarotene)decreases brain beta-amyloid peptides in APP23 mice

口服合成类视黄醇 Am80（他米巴罗汀）可减少 APP23 小鼠脑部 β-淀粉样肽

• 发表时间: 2009
• 期刊: Biol.Pharm.Bull. 32
• 作者: Kawahara K;Nishi K;Suenobu M;Ohtsuka H;Maeda A;Nagatomo K;Kuniyasu A;Staufenbiel M;Nakagomi M;Shudo K;Nakayama H
• 通讯作者: Nakayama H

腫瘍選択的オートファジー誘導に基づく白血病治療薬の開発

基于肿瘤选择性自噬诱导的白血病治疗方法的开发

• 发表时间: 2010
• 作者: 國安明彦;西村真平;中山仁
• 通讯作者: 中山仁

細胞内導入キャリアとしてのミクログリア選択的ペプチドリガンド

小胶质细胞选择性肽配体作为细胞内递送载体

• 发表时间: 2009
• 作者: Okano-Kosugi H;Matsushita O;Asada S;Herr AB;Kitagawa K;Koide T.;山中暢人
• 通讯作者: 山中暢人