ジアシルグリセロールキナーゼと相互作用する細胞内因子の検索

寻找与二酰甘油激酶相互作用的细胞内因子

• 批准号: 09771989
• 负责人: 今井 伸一
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771989/
• 关键词: ジアシルグリセロール; ジアシルグリセロールキナーゼ; two-hybrid

ジアシルグリセロールキナーゼ(DGK)には組織分布が異なる複数のアイソザイムが存在し、それぞれが一次構造が大幅に異なる興味ある機能ドメイン(亜鉛フィンガーやEFハンドモチーフ等)を持っている。しかし、それらDGKアイソザイムの生理機能はいまだ不明である。その理由として、DGK(の各ドメイン)と直接相互作用する因子、すなわちactivatorやinhibitor等の活性調節因子、膜との結合に関与する因子等、が不明で、具体的に連関する経路が明らかでないことが挙げられる。本研究では、DGKα及びDGKδと相互作用する細胞内因子の検出、同定を試みた。DGKαの全長及びC1、C4領域をbaitとして、胸腺cDNAライブラリーを酵母のtwo-hybrid systemによりスクリーニングし、相互作用する蛋白質のクローニングを試みた。しかし、DGKαと相互作用する蛋白質の同定はできなかった。DGKδのC端部分をbaitとして、ヒト精巣cDNAライブラリーを同様の方法でスクリーニングを行ったところ2つのクローンが得られた。一つはDGKδを、もう一つは未知のタンパク質をコードしていた。この未知のタンパク質の全長のcDNAクローニングを行ったところ、1210アミノ酸からなるタンパク質をコードしていた。このタンパク質はN端部分にprotein kinase domainを持っており、現在、このタンパク質の性質を解析中である。

ジ ア シ ル グ リ セ ロ ー ル キ ナ ー ゼ (DGK) に は が distribution different な る plural の ア イ ソ ザ イ ム が し, そ れ ぞ れ が が に significantly different structures a な る tumblers あ る function ド メ イ ン (亜 lead フ ィ ン ガ ー や EF ハ ン ド モ チ ー フ etc) を hold っ て い る. Youdaoplaceholder5 ム である, それらDGKア ソザ ソザ ム ム physiological functions である まだ まだ unknown である. そ の reason と し て, DGK (の ド メ イ ン) と direct interaction す る factor, す な わ ち activator や inhibitor etc. の activity regulating factor, membrane と の combining に masato and す る factor and uncertain で が, concrete に even masato す る 経 road が Ming ら か で な い こ と が 挙 げ ら れ る. In this study, で で, DGKα and びDGKδと interact with する intracellular factors 検 検 and co-determine を test みた. DGK alpha の span and び C1, C4 を bait と し て, thymus cDNA ラ イ ブ ラ リ ー の を yeast two hybrid system - に よ り ス ク リ ー ニ ン グ し, interaction す る protein の ク ロ ー ニ ン グ を try み た. The と (a type of protein) する is homomorphic with the する (a type of protein) で (a type of protein) で (a type of protein) な (a type of protein) った (a type of protein). DGK delta の C end part を bait と し て, ヒ ト fine 巣 cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を with others の way で ス ク リ ー ニ ン グ を line っ た と こ ろ 2 つ の ク ロ ー ン が must ら れ た. A <s:1> て DGKδを, う う a <s:1> <s:1> unknown <s:1> タ パ パ <s:1> quality をコ ド ド て て た た. こ の unknown の タ ン パ ク mass over の の cDNA ク ロ ー ニ ン グ を line っ た と こ ろ, 1210 ア ミ ノ acid か ら な る タ ン パ ク qualitative を コ ー ド し て い た. こ の タ ン パ ク qualitative は n-terminal part に protein kinase domain を hold っ て お り, now, こ の タ ン パ ク qualitative nature の を parsing で あ る.