細胞内輸送・分泌を制御する機能分子の探索:先天的分泌異常症モデルからのアプローチ

寻找控制细胞内转运和分泌的功能分子：先天性分泌障碍模型的方法

• 批准号: 09772057
• 负责人: 林 泉
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09772057/
• 关键词: 分泌; ブラジキニン; カリクレイン; カリウム; ATP感受性カリウムチャネル; 腎臓; カリクレイン・キニン系; 高血圧; Brown Norway Katholiekラット; カリクレイン・キニン; 高分子キニノゲン; 分泌障害; DOCA-saltラット; 高血圧症; 腎カリクレイン

平成9年度の本研究課題では、細胞内で生合成された後に細胞外へと能動的に分泌されるタンパク質について、その細胞内輸送・分泌を制御する機能分子の探索を行うことを目的として、分泌異常症モデルからのアプローチを試みた。その結果、まず生理活性ペブチドであるプラジキニンの産生酵素であるカリクレインが、ラット腎皮質部から高カリウム刺激により遊離されること、そしてdeoxycorticosterone acetate(DOCA)-salt誘発高血圧ラットの腎皮質部からは、カリウム刺激に対するカリクレインの遊離が低下していることを見い出した。そこで平成10年度では、まずカリウム刺激によるカリクレインの遊離機構についてin vitroで検討した結果、高カリウムによりATP感受性カリウムチャネルの遮断を引き起こし、さらには一部電位依存性カルシウムチャネルの活性化を生じ、最終的にはサイトカラシンBにより抑制される細胞内収縮蛋白と連関することにより、腎カリクレインが能動的に腎臓から分泌される可能性が示唆された。そこでさらに腎ATP感受性カリウムチャネルを、カリクレインの分泌制御分子の標的としたin vivoの検討を行った。すなわち腎カリクレインの分泌を亢進させ、高血圧発症に対して防御的に作用する腎カリクレイン・キニン系を促進させることを期待し、カリウム刺激により腎カリクレインの分泌能が低下していると推定されDOCA-saltラットにATP感受性カリウムチャネル阻害薬であるglibenclamideを投与した結果、その血圧上昇が有意に抑制された。以上の本研究課題の成果から、腎ATP感受性カリウムチャネルに対する特異的遮断薬が、降圧因子の一つである腎カリクレインの細胞外分泌を促進することを介して、高血圧症の治療薬となりうる可能性が示唆された。

Pp.47-53 9 year の this research topic で は, intracellular で biosynthesis さ れ た after に extracellular へ と motile に secretion さ れ る タ ン パ ク qualitative に つ い て, そ の intracellular delivery, secrete を suppression す る functional molecular の exploration line を う こ と を purpose と し て, abnormal secretion モ デ ル か ら の ア プ ロ ー チ を try み た. そ の results, ま ず physiological activity ペ ブ チ ド で あ る プ ラ ジ キ ニ ン の produce enzymes で あ る カ リ ク レ イ ン が, ラ ッ ト renal cortex of か ら high カ リ ウ ム stimulus に よ り free さ れ る こ と, そ し て deoxycorticosterone Acetate (DOCA) - salt induced 発 high blood 圧 ラ ッ ト の renal cortex of か ら は, カ リ ウ ム stimulus に す seaborne る カ リ ク レ イ ン の low free が し て い る こ と を see い out し た. 10 year そ こ で pp.47-53 で は, ま ず カ リ ウ ム stimulus に よ る カ リ ク レ イ ン の free agency に つ い て in Beg し vitro で 検 た results, high カ リ ウ ム に よ り ATP sensitivity カ リ ウ ム チ ャ ネ ル の interrupt を lead き up こ し, さ ら に は a potential dependency カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル の activeness を じ, final に は サ イ ト カ ラ シ ン B に よ り inhibit さ れ る 収 shrinkage protein in the cell と even masato す る こ と に よ り, kidney カ リ ク レ イ ン が The active に kidney ら secretes される possibility が indicates された. そ こ で さ ら に renal ATP sensitivity カ リ ウ ム チ ャ ネ ル を, カ リ ク レ イ ン の secretion system royal molecular の mark と し た in vivo の 検 line for を っ た. す な わ ち renal カ リ ク レ イ ン の secretion を hyperthyroidism さ せ, high blood 圧 発 disease に し seaborne て defensive role す に る renal カ リ ク レ イ ン · キ ニ ン was を facilitates さ せ る こ と を expect し, カ リ ウ ム stimulus に よ り renal カ リ ク レ イ ン の can secrete が low し て い る と presumption さ れ DOCA - salt ラ ッ ト に ATP sensitivity カ リ ウ ム チ ャ ネ The results of the administration of the inhibitory drug であるglibenclamideを to <s:1> た were that そ <s:1> blood pressure increase が was intentionally に inhibited された. Above の の results of this study subject か ら, kidney ATP sensitivity カ リ ウ ム チ ャ ネ ル に す seaborne る specific interrupt 薬 が, fall 圧 factor の つ で あ る renal カ リ ク レ イ ン の exocrine cells を promote す る こ と を interface し て therapy の disease, high blood 圧 薬 と な り う が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Qinghong Zhang: "Functional β1-integrins release the suppression of fibronectin matrix assembly by vitronectin." The Journal of Biological Chemistry. 274・1. 368-375 (1999)

张清红：“功能性 β1-整合素释放玻连蛋白对纤连蛋白基质组装的抑制。”《生物化学杂志》274・1 (1999)。

Masataka Majima: "Significant roles of inclucible cyclooxygenase (COX)-2 in angiogenesis in rat sponge implants." The Japanese Journal of Pharmacology. 75・2. 105-114 (1997)

Masataka Majima：“不溶性环氧合酶 (COX)-2 在大鼠海绵植入物血管生成中的重要作用。”日本药理学杂志 75・2 (1997)。

Taei Matsui: "Purification and amino acid sequence of halystase from snake venom of Agkistrodon halys blomhoffii,a serine protease that cleaves specifically fibrinogen and kininogen." European Journal of Biochemisty. 252・3. 569-575 (1998)

Taei Matsui：“Agkistrodon halys blomhoffii 蛇毒中的裂解酶的纯化和氨基酸序列，这是一种特异性裂解纤维蛋白原和激肽原的丝氨酸蛋白酶”，欧洲生物化学杂志 569-575。

Izumi Hayashi: "Reduction of Sodium deoxycholic acid-induced scratching behaviour by bradykinin B_2 receptor antagonists." British Journal of Pharmacology. 126・1. 197-204 (1999)

Izumi Hayashi：“缓激肽 B_2 受体拮抗剂减少脱氧胆酸引起的抓挠行为”，《英国药理学杂志》126·1 (1999)。

Shinichi Nakajima: "Effects of a neutral endopeptidase inhibitor,EP102,on the development of deoxycorticasterone acetate-salf hypertension in kininogen-deficient Grown Norway Kathdiek rats." International Journal of Tissue Reactions. 20・2. 45-56 (1998)

Shinichi Nakajima：“中性肽链内切酶抑制剂 EP102 对缺乏激肽原的挪威 Kathdiek 大鼠发生醋酸脱氧皮质酮高血压的影响”，《国际组织反应杂志》20·2。