分子間電子移動反応における蛋白質の動的挙動の効果-共鳴ラマン分光法による解析

蛋白质动态行为对分子间电子转移反应的影响 - 共振拉曼光谱分析

• 批准号: 10780399
• 负责人: 海野 雅司
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780399/
• 关键词: 共鳴ラマン; ヘム蛋白質; 電子移動; チトクロームP450; 鉄硫黄蛋白質; 振動分光; 複合体; 光受容蛋白質; 一酸化窒素

本研究の目的は蛋白間における電子移動反応と複合体形成による蛋白構造変化の相関を明らかにすることである。そこで複合体形成が蛋白質の活性中心に及ぼす効果を主に共鳴ラマン分光法によって解析した。その結果以下の知見を得ることに成功した。1.ヘム酵素のチトクロームP450camの一酸化炭素結合体について電子供与蛋白質であるプチダレドキシンとの複合体形成の効果について調べた。その結果チトクロームP450camのヘム鉄と一酸化炭素の間の伸縮振動が複合体形成によって大きく変化することを見いだし、活性部位近傍の構造が大きく変化することを明らかにした。2.上記の結果と関連してチトクロームP450camと複合体は形成する電子供与体とはならないチトクロームのb5の効果についても検討した。その結果1.で見られた変化はプチダレドキシン特有の効果であることを見いだした。3.チトクロームP450camと複合体を形成したプチダレドキシンの活性部位の構造を磁気共鳴法で調べたところ、ヘム鉄のスピン状態がプチダレドキシンの活性部位に影響することを見いだした。4.蛋白間の複合体形成が機能発現に重要だと考えられている光受容黄色蛋白について、共鳴ラマン分光法を用いてその反応中間体の構造を決定することに成功した。

The purpose of this study was to form the antisense complex between proteins and to form a recombinant protein phase to clarify the molecular weight. The protein and active center of the complex were formed and the main components of the complex were analyzed by spectrophotometry. The results show that the following information is successful. 1. The combination of P450 camphor and acidified carbon is used to form a complex between the enzyme and the protein to form a complex. The results showed that the complex of acidified carbon was formed by stretching and vibrating between the acidified carbon and the active site, and the active site was close to the active site. The results showed that the P450cam complex formed a complex of acidified carbon. two。 The result of the previous report shows that the P450cam complex has been successfully generated. The battery is used as a donor and the body as a donor. The result is that b5 is not successful. The results are as follows: 1. I don't know. I don't know what's going on. 3. The active part was formed by the formation of the P450cam complex. The active part was made by magnetic resonance method. 4. The formation of protein complex can be used to detect the importance of photoluminescence, light tolerance of xanthoprotein, and spectrophotometry to determine the success of protein complex formation.

项目成果

Macdonald et al.: "Identification of the Fe-O-O Bending Mode in Oxycytochrome P450cam by Resonance Raman Spectroscopy" Journal of the American Chemical Society. 121・3. 376-380 (1999)

Macdonald 等人：“通过共振拉曼光谱鉴定 Oxycytochrome P450cam 中的 Fe-O-O 弯曲模式”，美国化学会杂志 121・3（1999 年）。

Macdonald, et al.: "Identification of the Fe-O-O Bending Mode in Oxycytochrome P450cam by Resonance Raman Spectroscopy"Journal of the American Chemical Society. 121・3. 376-380 (1999)

Macdonald 等人：“通过共振拉曼光谱鉴定 Oxycytochrome P450cam 中的 Fe-O-O 弯曲模式”，美国化学会杂志 121・3（1999 年）。

Shimada, et al.: "Putidaredoxin-Cytochrome P450cam Interaction,Spin State of the Heme lron Modulates Putidaredoxin Structure"Journal of the Biological Chemistry. 274・14. 9363-9369 (1999)

Shimada 等人：“Putidaredoxin-Cytochrome P450cam 相互作用，血红素的自旋状态调节 Putidaredoxin 结构”生物化学杂志 274·14（1999）。

Unno, et al.: "Evidence for a Protonated and cis Configuration Chromophore in the Photobleached Intermediate of Photoactive Yellow Protein"Journal of the American Chemical Society. (印刷中).

Unno 等人：“光活性黄色蛋白光漂白中间体中质子化和顺式构型发色团的证据”美国化学会杂志（正在出版）。