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シナプス形成の遺伝解析

突触形成的遗传分析

基本信息

批准号：
11740414
负责人：
吉原基二郎
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)シナプス可塑性、形成機構解明の為のシナプトブレビン突然変異体の解析シナプス小胞タンパクであるシナプトブレビンが完全に欠失したショウジョウバエ突然変異体を神経筋シナプスにおけるシナプス伝達についてバッチクランプ法を用いて電気生理学的に解析したところ、神経の興奮に同期して生ずる神経誘発電流が特異的に欠損していることがわかった。一方、形態学的な解析を行ったところ、シナプトブレビンが存在しなくても正常なシナプスが作られることがわかった。シナプトブレビンにおいても残存する微小シナプス電流を解析したところ、微小シナプス電流の生ずる頻度は細胞外カルシウム濃度に依存することがわかった。さらに、シナプス可塑性の機構にアプローチする目的で、cAMPによる調節を調べたところ、シナプトブレビン突然変異体では細胞外カルシウムが存在しないとcAMPによる微小シナプス電流頻度の促進がみられないことがわかった(Yoshihara et al.1999)。この結果は、cAMPによるシナプス可塑性の機構に二つの経路が存在することを示唆しており、さらに、カルシウム存在下での実験によってこのことを確認した(投稿中)。(2)新規突然変異体の単離、解析さらに新たなシナプス形成に関与する遺伝子を単離するため、エンハンサー・トラップ系統の大規模なスクリーニングを行った。エンハンサー・トラップ用のP因子としてはイーストの転写因子GAL4を発現させることのできるP因子を使用した(Brand and Perrimon,1993)。申請者と基礎生物学研究所の伊藤啓博士のふたりが中心になって、全国の有力研究所と連携して全国規模のコンソーシアムを形成した(NP project)。主に研究代表者がそのシステムの改良を行い、全メンバーによってこのP因子挿入を持つ約5000系統を樹立した。この系統から発現パターンによって多くのシナプス形成に関する突然変異体の候補を得ている。

(1)The plasticity and mechanism of formation explain the mechanism of sudden change in the structure of the brain. The mechanism of sudden change in the structure of the brain. The excitation of the brain is simultaneous with the generation of the brain induced current, which is specific to the brain. A square, morphological analysis of the line, the existence of the normal line, the existence of the normal line The frequency of generation of minute electric currents depends on the concentration of the residual electric currents. The mechanism of plasticity is regulated by cAMP, and the mechanism of plasticity is regulated by cAMP (Yoshihara et al. 1999). These results confirm the existence of two pathways in the mechanism of cAMP regulation and plasticity (in submission). (2)The new regulation suddenly changes the separation, analysis and formation of new types of products, and the separation and analysis of new types of products. The P factor used in the development of the GAL4 was used (Brand and Perrimon,1993). The applicant is Dr. Kaitō Ito of the Institute of Basic Biology, and the National Institute of Powerful Research has joined forces to form a nationwide project (NP project). The main research representative has established about 5000 systems to improve the system and the whole system. This system is designed to create a wide variety of candidates for sudden change.