ショウジョバエ神経筋接合部をモデルとしたシナップス形成機構の遺伝学的解析

以果蝇神经肌肉接头为模型的突触形成机制的遗传分析

• 批准号: 05263205
• 负责人: 吉原 基二郎
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05263205/
• 关键词: ショウジョウバエ; 神経筋接合; シナプス形成; エンハンサートラップ; 電気生理

1.エンハンサートラップ法による神経筋接合部形成に異常を持つ突然変異体の探索(吉原担当)我々は、神経筋接合部形成に働いている分子を遺伝学的に同定する目的で、エンハンサートラップ系統のスクリーニングを行っている。この目的のために、(1)運動神経細胞あるいは筋細胞での発現が見られる(2)孵化不能、即ち、致死である、という二つの基準を満たすものを候補として選択している。神経軸索でもレポーター遺伝子の産物が見られるKZTRAPの挿入系統を樹立する作業を続けており、現在の所、400の挿入系統を樹立しているが、95系統が致死であった。1acZの発現についてはまだ調査中であるが、そのうちの1系統においてはCNSのニューロピル及び末梢へ向かう神経軸索で1acZが発現していた。この致死系統の詳細な解析はまだ行っていないが、このことから、我々の方法が上に述べた目的に対して有効であると考えられるので今後このスクリーニングを続け、神経筋接合部形成突然変異の候補とし、続いて形態学的手法及び電気生理学による解析を行う予定である。2.正常な神経筋接合部形成過程の記載(1)形態学的記載(吉原担当);神経筋接合部でのシナプス形成の過程を、主に抗HRP抗体を用いて光学顕微鏡のレベルで追跡した。また、電子顕微鏡を用いてシナプス形成の過程に於ける微細形態の変化を記述している(ミシガン州立大学Rheuben博士との共同研究)。(2)電気生理学的記載(城所担当);胚期において、神経筋接合部での自発的なシナプス電流の変化をwhole cell patch clamp法によって解析した。その結果、胚発生の後期(stage17)においてシナプス伝達の効率が大きく変化することが明らかになった。

1. The study of abnormal and sudden changes in the formation of neuromuscular junction (Yoshihara) in the process of neuromuscular junction formation is carried out for the purpose of determining the molecular identity of neuromuscular junction formation. (1) The occurrence of muscle cells in motor neurons;(2) The occurrence of muscle cells in motor neurons; and (3) The occurrence of muscle cells in motor neurons. KZTRAP's access system is installed in the production line of the central axis, and the current access system is installed in the production line of the central axis. 1acZ is found in the middle of the investigation. It is found in the middle of the CNS and the distal axis. The detailed analysis of this lethal system is based on the above objectives, candidates for sudden changes in neuromuscular junction, morphological techniques and electrophysiological analysis. 2. Description of the formation process of normal neuromuscular junction (1) Morphological description (Yoshihara); The formation process of neuromuscular junction was traced by optical microscopy using anti-HRP antibodies. The process of micromorphology formation by electron microscopy is described in this paper.(Joint research by Dr. Rheuben, Mishikasu State University) (2)Electric physiology records (city responsibility); embryonic stage, neuromuscular junction of the spontaneous change of current and whole cell patch clamp method for analysis The result of the embryo development in the late stage (stage 17), the rate of development of the embryo, the rate of development, the rate of development of the embryo, the rate of development, the rate of development of the embryo, the rate of development, the rate of development, the rate of development of the embryo, the rate of development, the rate of development, the rate of development of the embryo, the rate, the rate of development rate, the embryo, the rate of development

项目成果

Saito,M.: "Inhibition of nerve-and agrin-induced acetylcholine receptor clustering on Xenopus muscle cells in culture." Develop.Brain Res.71. 9-17 (1993)

Saito,M.：“抑制神经和集聚蛋白诱导的乙酰胆碱受体在培养的爪蟾肌肉细胞上聚集。”

Chang,H.: "Ion permeation properties of the glutamate receptor channel in cultured embryonic Drosophila myotubes." J.Physiol.(London). (in press).

Chang，H.：“培养的胚胎果蝇肌管中谷氨酸受体通道的离子渗透特性。”

Kidokoro,Y.: "Developmental changes of transmitter gated channels." Jap.J.Physiol.43. 727-743 (1993)

Kidokoro,Y.：“发射器门控通道的发展变化。”

Kidokoro,Y.: "Spontaneous synaptic currents at neuromuscular junctions in Drosophila embryos and larvae." Neurosci.Res.(in press).

Kidokoro，Y.：“果蝇胚胎和幼虫神经肌肉接头处的自发突触电流。”