DNAメチル化によって発現制御され胃がんの発生・進展に寄与する遺伝子の単離

分离表达受 DNA 甲基化调节并有助于胃癌发生和进展的基因

• 批准号: 11770108
• 负责人: 金井 弥栄
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770108/
• 关键词: DNAメチル化; 5-azacytidine; 発現制御; がん抑制遺伝子; 多段階発がん; Wip1; TROP2; B4-2; HIC-1; ヘテロ接合性喪失; 前がん状態、胃がん; 慢性胃炎; 腸上皮化生

DNAメチル化によって発現が制御されヒトがんの生物学的特性の決定に寄与する遺伝子の単離を試みるため、DNAメチル化阻害剤である5-azacytidine処理により増殖が抑制された培養胃がん細胞株においてdifferential display法を施行した。5-azacytidine処理によりWip1,TROP2,B4-2,BRCA-2 region transcription unit CG005,cofilin,ROCK,CD44ならびにinterferon-inducible protein 6-16 mRNA発現の経時的な変化を認め、5-azacytidine処理によって発現の変化する未知遺伝子も単離し得た。これらの遺伝子のmRNA発現を臨床手術材料においても検討したところ、非がん粘膜に比し胃がんにおいてWip1,B4-2ならびにcofilinの、非がん粘膜に比し大腸がんにおいてWip1,B4-2,BRCA-2 region transcription unit CG005,cofilinならびにROCKの、非がん肝組織に比し肝細胞がんにおいてTROP2,B4-2ならびにBRCA-2 region transcription unit CG005のmRNA発現の有意な低下を認め、大腸がんにおいてTROP2発現は有意に亢進していた。Wip1ならびにBRCA-2 region transcription unit CG005の発現低下は肝細胞がんの分化度と有意に相関し、門脈侵襲を伴う肝細胞がんにおいて特に発現が低下していた。TROP2発現は正常肝組織に比し前がん状態にある慢性傷害肝において有意に亢進し、肝細胞がんの悪性進展に伴って逆に低下していた。B4-2の発現は特にB型肝炎ウイルス感染に伴って低下していた。これらの知見は、DNAメチル化がこれらのがん関連遺伝子の発現を直接または間接に制御してヒトの多段階発がんに寄与する可能性を示している。

DNA sequencing was performed to determine the biological characteristics of the control cells, to determine the isolation of the DNA sequence, and to determine the differential display of the DNA sequence inhibitor, 5-azacytidine treatment, and to inhibit the proliferation of cultured gastric cell lines. 5-azacytidine treatment for Wip1, TROP2,B4-2,BRCA-2 region transcription unit CG005,cofilin,ROCK, CD44, and the expression of interferon-inducible protein 6-16 mRNA during the process of recognition, 5-azacytidine treatment for the expression of unknown genes. The expression of cofilin mRNA in the liver tissue of the patients undergoing surgical procedures was detected in the gastric mucosa by Wip1, B4 - 2,BRCA-2 region transcription unit CG005,cofilin by ROCK and liver tissue by TROP2. mRNA expression of B4-2 and BRCA-2 region transcription unit CG005 was intentionally decreased and TROP2 expression was intentionally increased. The expression of Wip1 and BRCA-2 region transcription unit CG005 was decreased, and the differentiation of hepatocytes was significantly correlated with portal invasion. TROP2 appears to be intentionally hyperactive compared to normal liver tissue and is associated with decreased liver function. The development of B4-2 is especially associated with hepatitis B infection. The possibility of direct or indirect control of the development of multi-stage genes in the presence of these genes was demonstrated.

项目成果

Tohru Harabayashi, Yae Kanai, et al.: "Reduction of integrin β4 and enhanced migration on laminin in association with intraepithelial spreading of urinary bladder carcinomas"J. Urol.. 161. 1364-1371 (1999)

Tohru Harabayashi、Yae Kanai 等人：“整合素 β4 的减少和层粘连蛋白上迁移的增强与膀胱癌上皮内扩散相关”J. Urol.. 161. 1364-1371 (1999)

Kanai Y,Hui AM,Sun L,Ushijima S,Sakamoto M,Tsuda H,Hirohashi S: "DNA hypermethylation at the D17S5 locus and reduced HIC-1 mRNA expression are associated with hepatocarcinogenesis."Hepatology. 29. 703-709 (1999)

Kanai Y、Hui AM、Sun L、Ushijima S、Sakamoto M、Tsuda H、Hirohashi S：“D17S5 位点 DNA 高甲基化和 HIC-1 mRNA 表达减少与肝癌发生相关。”肝病学。

Atsushi Saito, Yae Kanai, et al.: "Disruption of E-cadherin-mediated cell adhesion systems in young patients with gastric cancers"Jpn. J. Cancer Res.. 90. 993-999 (1999)

Atsushi Saito、Yae Kanai 等：“年轻胃癌患者中 E-钙粘蛋白介导的细胞粘附系统的破坏”Jpn。

Kanai Y,Ushijima S,Nakanishi Y,Hirohashi S: "Reduced mRNA expression of the DNA demethylase, MBD2,in human colorectal and stomach cancers."Biochem. Biophys. Res.Commn.. 264. 962-966 (1999)

Kanai Y、Ushijima S、Nakanishi Y、Hirohashi S：“人类结直肠癌和胃癌中 DNA 去甲基酶 MBD2 的 mRNA 表达降低。”Biochem。

Yutaka Kondo, Yae Kanai, et al.: "Microsatellite instability associated with hepatocarcinogenesis"J. Hepatol.. 31. 529-536 (1999)

Yutaka Kondo、Yae Kanai 等：“与肝癌发生相关的微卫星不稳定性”J。