サイトメガロウイルスによる同種骨髄移植後の免疫再構築の抑制機序の解明

巨细胞病毒引起的同种异体骨髓移植后免疫重建抑制机制的阐明

• 批准号: 11770249
• 负责人: 森 毅彦
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Saitama Medical University (2000)Keio University (1999)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770249/
• 关键词: サイトメガロウイルス; 同種骨髄移植; 再活性化; CMV antigenemia; real-time PCR; preemptive therapy; 移植片対宿主病; 免疫再構築; ganciclovir

本研究は同種骨髄移植後の免疫抑制下におけるサイトメガロウイルス(CMV)の再活性化の機序およびCMVが抗CMV免疫を含めた移植後の免疫再構築に与える影響を解明することを目的とした。まず同種骨髄移植後のCMVの再活性化を正確かつ高感度に検出するために移植患者の末梢血顆粒球中のCMV抗原(pp65抗原)を移植後に定期的に測定した(CMV antigenemia法)。さらに症例を選別して,CMV抗原が検出された症例に対してganciclovirによる抗ウイルス療法を開始し,CMV感染症の発症予防効果を検討した。また同時により感度の高いと考えられるpolymerase chain reaction(PCR)法による再活性化の検出を,最近開発された定量性PCR(real-time PCR)にておこない、CMV antigenemia法と比較検討した。同種骨髄移植50例の患者が評価可能であった。移植後ほぼ半数の患者にCMV antigenemiaの陽性化がみられた。そして我々のこれまでの経験から中等症以上の急性移植片対宿主病(GvHD)の発症症例はCMV感染症発症のハイリスク症例となるため,CMV antigenemiaが陽性化しGvHDを同時に発症している症例に対してのみ抗CMV療法を開始した。この結果,50例中CMV感染症の中で最も致死率の高いCMV肺炎の発症は1例もみられなかった。しかし、CMV胃腸炎7例、網膜炎2例の発症がみられた。特にCMV胃腸炎症例では発症時にCMV antigenemiaが陰性の症例が多く、先行性という点でCMV antigenemia法には問題があると考えれた。そこでより高感度と考えられるreal-time PCRを用いて保存検体にてretrospectiveに再活性化検出を行い、比較検討した。real-time PCRは血漿から抽出したDNAを用いた。CMV antigenemiaが先行しない症例を多く含むCMV胃腸炎7例中6例においても発症前あるいは発症時にreal-time PCRでCMVが検出され,real-time PCRのCMV antigenemiaよりも優れたCMV再活性化の早期検出の有効性が示された(T.Mori et al,2000)。またさらに両検査が陽性化した15例で再検討した結果、real-time PCRはCMV antigenemiaに比して有意に早期に再活性化を検出することが明らかになった。現在、ハイリスク症例を対象としてreal-time PCRを用いて早期に抗ウイルス療法を開始するpreemptive therapyの有効性と抗CMV免疫の回復を免疫学的に解析する研究を進めており、より効果的なの治療法の確立と免疫学的再構築の解明を検討している。

The aim of this study was to elucidate the mechanism of CMV reactivation under immunosuppression after allogeneic bone transplantation and the effect of CMV on immune remodeling after allogeneic bone transplantation. CMV antigen (pp65 antigen) in peripheral blood granulocytes of transplant patients was detected at regular intervals after transplantation (CMV antigenemia method). In addition,CMV antigen was detected in selected cases, and anti-CMV therapy was initiated to investigate the development and prevention of CMV infection. A comparative study was conducted on reactivation detection by polymerase chain reaction(PCR) method, real-time PCR method and CMV antigenemia method. 50 cases of allogeneic bone transplantation were evaluated. After transplantation, half of the patients were infected with CMV antigenemia. In addition,CMV antigenemia became positive for GvHD, and anti-CMV therapy was initiated in patients with acute graft-versus-host disease (GvHD). Among the 50 cases of CMV infection, the mortality rate was the highest, and the incidence of CMV pneumonia was the highest in 1 case. 7 cases of CMV gastroenteritis and 2 cases of omental inflammation developed symptoms. In particular, CMV antigenemia is negative in cases of gastrointestinal inflammation. The high sensitivity and real-time PCR were used in the preservation of the assay, in the retrospective assay, and in the comparative assay. Real-time PCR was used to extract DNA from plasma. CMV antigenemia was detected by real-time PCR in 6 of 7 cases of CMV gastroenteritis, and real-time PCR for CMV antigenemia was performed in 6 of 7 cases of CMV gastroenteritis, showing early detection of CMV reactivation (T.Mori et al,2000). The results of the re-examination and real-time PCR of CMV antigenemia were compared with those of intentional early reactivation. Now, the use of real-time PCR in the early stage of anti-CMV therapy, effective anti-CMV immune recovery, immunological analysis, research progress, and the establishment of effective treatment methods for immune reconstruction are discussed.

项目成果

Takehiko Mori et al.: "Risk-adapted preemptive therapy for cytomegalovirus disease in patients undergoing allogeneic bone marrow transplantation"Bone Marrow Transplantation. (in press). (2000)

Takehiko Mori 等人：“接受同种异体骨髓移植的患者巨细胞病毒病的风险适应性先发性治疗”骨髓移植。

T.Mori, et al.: "Risk-adapted pre-emptive therapy for cytomegalovirus disease in patients undergoing allogeneic bone marrow transplantation."Bone Marrow Transplantation. 25. 765-769 (2000)

T.Mori 等人：“接受同种异体骨髓移植的患者巨细胞病毒病的风险适应性先发制人疗法。”骨髓移植。