遺伝子操作マウスの慢性大腸炎発病におけるIL-18/IL-18R機構異常の解析

基因工程小鼠慢性结肠炎发展中IL-18/IL-18R机制异常分析

• 批准号: 11770281
• 负责人: 岡沢 啓
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770281/
• 关键词: インターロイキン18; 遺伝子操作マウス; 腸管免疫

現在までに、クローン病炎症腸管粘膜においてインターロイキン18(IL-18)の発現が浸潤マクロファージにおいてIL-12とともに増強し、腸管粘膜内リンパ球の増殖因子として機能を有することを報告した(Kanai T et al.Gastroenterology.2000 in press)。我々は、今回、慢性腸炎におけるIL-18の関与を直接的に証明する目的にて、遺伝子工学的に作製した慢性腸炎モデルマウス、TCRα鎖ノック・アウト(KO)マウス、IL-7トランスジェニック(Tg)マウスを用いて、IL-18/IL/18R機構の解析を行った。(成績)1)TCRα鎖KOマウス、IL-7・Tgマウス腸管粘膜内リンパ球のIL-18R発現の増強、粘膜内マクロファージのIL-18の発現の増強を認めた。2)TCRα鎖KOマウス、IL-7・Tgマウス腸管粘膜内リンパ球において、IL-12、IL-18は増殖因子として機能することを示した。3)TCRα鎖KOマウスにおいて、抗マウスIL-18抗体によって発症が抑制されること、IL-18の活性化因子であるICE分子が関与することを証明した。次年度はTCRα鎖KOマウス、IL-7・TgマウスにおけるCryotopatch構造の免疫染色での比較検討、また、同構造における腸炎発症時のIL-18/IL-18R機構の解析、実体顕微鏡下に分離したリンパ球の細胞表面マーカー、サイトカイン産生能を評価し、腸炎発症の機序を追究したい。また、分離した未分化リンパ球の培養を行い、分化発達におけるIL-18、IL-7の関与につき検討する。

The development of IL-18 in the intestinal mucosa of patients with acute intestinal inflammation is reported. IL-12 and IL-18 are increased. The function of proliferation factors in intestinal mucosa is also reported (Kanai T et al. Gastroenterology. 2000 in press). The relationship between IL-18 and IL-18 in chronic enteritis was demonstrated directly. The mechanism of IL-18/IL-18R was analyzed. (Results)1) Increased expression of IL-18R and IL-7 in intestinal mucosa. 2)TCRα gene expression, IL-7, Tg, IL-12, IL-18, and proliferation factors in intestinal mucosa. 3)TCRα lock KO, anti-IL-18 antibody, inhibition of disease, IL-18 activation factor, ICE molecule and related evidence. In the next year, we compared the immunostaining of TCRα-Ko, IL-7, Tg and Cryotopatch constructs, analyzed the IL-18/IL-18R mechanism in the development of enteritis, isolated the cell surface of the TCR α-Ko, IL-7, Tg and its production, and investigated the mechanism of enteritis development. IL-18, IL-7 and IL-18 are involved in the culture, differentiation and development of undifferentiated cells.

项目成果

Hisamitsu T et al: "IFN-inducible gene family 1-8U expression in colitis-associated colon cancer and severely inflamed colonic mucosa in ulcerative colitis"Cancer Res. 59. 5927-5931 (1999)

Hisamitsu T 等人：“结肠炎相关结肠癌和溃疡性结肠炎中严重发炎的结肠粘膜中的 IFN 诱导基因家族 1-8U 表达”Cancer Res。

Watanabe M et al: "Mucosal IL-7-mediated immune responses in chronic colitis-IL-7 transgenic mouse model-"Immunol Res.. (in press). (2000)

Watanabe M 等人：“慢性结肠炎中粘膜 IL-7 介导的免疫反应 - IL-7 转基因小鼠模型 -”Immunol Res..（印刷中）。

Watanabe M, et al: "Interleukin-7 transgenic mice develop chronic colitis with decrease of Interleukin-7 protein accumulation in the colonic mucosa" J Exp Med. 187. 389-402 (1998)

Watanabe M 等人：“Interleukin-7 转基因小鼠出现慢性结肠炎，结肠粘膜中 Interleukin-7 蛋白积累减少”J Exp Med。

Nakazawa A et al: "Functional expression of a costimulatory molecule CD86 on epithelial cells in the inflamed colonic mucosa"Gastroenteology. 117. 536-545 (1999)

Nakazawa A 等人：“共刺激分子 CD86 在发炎结肠粘膜上皮细胞上的功能表达”胃肠病学。

Kohyama M et al: "Cytolytic and IFN-γ-producing activities of γδ T cells in the mouse intestinal epithelium are TCR-β chain dependent"Proc natl Acad Sci,USA.. 96. 7451-7455 (1999)

Kohyama M 等人：“小鼠肠上皮中 γδ T 细胞的溶细胞和产生 IFN-γ 的活性是 TCR-β 链依赖性的”Proc natl Acad Sci,USA.. 96. 7451-7455 (1999)