扁桃体特異的遺伝子操作マウスの作成

创造杏仁核特异性基因工程小鼠

• 批准号: 17024018
• 负责人: 森 寿
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: University of Toyama
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17024018/
• 关键词: 扁桃体; 遺伝子操作マウス; BAC

本研究は、情動制御に重要な脳部位のうち、扁桃体神経核特異的に遺伝子操作を可能とするC57BL/6近交系の遺伝的背景を持ったマウス系統を樹立することを目的としている。C57BL/6系統マウスは、近交系として行動学的データーの蓄積があり学習能力に優れていること、新潟大脳研の崎村教授らにより樹立された生殖伝達効率の高い胚性幹(ES)細胞が存在すること、ゲノム情報が利用できるとともにゲノム遺伝子断片をバクテリア人工染色体(BAC)に組み込んだライブラリーが利用可能であること、などの利点がある。本年度は、扁桃体外側核ならびに内側核にそれぞれ選択性の高い発現を示すGastrin-releasing Peptide(GRP)ならびにLIM homeodomain protein 7/8のゲノム遺伝子に薬剤活性誘導型の遺伝子組換え酵素CrePR遺伝子を挿入したマウス系統、ならびにCre活性依存的にNMDA受容体のドミナントネガティブ体を発現するマウス系統の作成を進めた。従来の方法による標的遺伝子組み換えベクター(TV)の構築では、制限酵素を用いたゲノム遺伝子断片のクローニングや精製ステップが複数回必要であり、労力と時間を要した。一方、近年BACと相同遺伝子組換え酵素を用いて、大腸菌内でBACを遺伝子操作する方法が開発されてきた。我々は、その方法の一つであるCounter-selection BAC modification kit(GENE BRIDGES社)の薬剤耐性マーカーの改変、なちびに最終的にゲノム断片をクローニングするTVの配列を改変することにより、約1ヶ月でTVを作成する方法を確立した。これらの改変によりTV作成が容易になり、様々なTV作成に利用できるとともに、BACを用いた系統的な遺伝子操作が可能になった。現在作成したTVをES細胞に遺伝子導入し、標的遺伝子組み換えES細胞の取得を進めている。このうち、GRP-CrePRについては、相同組み換えESクローン候補を得た。

The purpose of this study is to establish the genetic background of C57BL/6 inbred line by analyzing the genetic manipulation of important parts of the tonsil nucleus. C57BL/6 System: Inbred Lines, Kinematics, Accumulation, Learning Ability, Establishment of High Reproductive Efficiency, Embryonic Stem (ES) Cell Presence, Information Utilization, Artificial Chromosome (BAC) Organization, and Possibility of Utilizationなどの利点がある。This year, we demonstrated high levels of selectivity in both the lateral and medial tonsil nuclei. We have also made progress in the construction of a system for the production of Gastrin-releasing Peptide(GRP) and LIM homedomain protein 7/8, an activity-inducible subunit of the CrePR gene. The method for constructing the target gene sub-set is to restrict the enzyme use and to refine the gene sub-set. In recent years, the use of BAC and BAC gene exchange enzymes in E. coli has been developed. We have established a method for the preparation of TV by using a Counter-selection BAC modification kit(GENE BRIDGES). This change is easy to make, easy to use, and easy to use. Now create a TV ES cell gene transfer, target gene transfer group, ES cell acquisition process. GRP-CrePR

项目成果

グルタミン酸受容体チャンネルの構造と機能

谷氨酸受体通道的结构和功能

• 发表时间: 2005
• 期刊: 生化学(総説) 77
• 作者: Kato Y;Takatsuki K;Kawahara S;Fukunaga S;Mori H;Mishina M;Kirino Y.;Takahashi Y.Mori H.Mishina M.Watanabe M.Konondo N.Shimomura J.Kubota Y.Matsuda K.Fukushima K.Shiroma N.Akasaka N.Nishida H.Imamura A.Watanabe H.Sugiyama N.Ikezawa M.Fujiwara T.;Takeuchi T.Miyazaki T.Watanabe M.Mori H.Sakimura K.Mishina M.;森 寿
• 通讯作者: 森 寿

情動学習の神経機構

情绪学习的神经机制

• 发表时间: 2006
• 期刊: 神経研究の進歩(総説) 50
• 作者: Ando;K.;Nagano;T.;Nakamura;A.;Konno;D.;Yagi;H.;Sato;M;森 寿
• 通讯作者: 森 寿

Control of Synaptic Connection by Glutamate Receptor δ2 in the Adult Cerebellum

• DOI: 10.1523/jneurosci.4740-04.2005
• 发表时间: 2005-02
• 期刊: The Journal of Neuroscience
• 作者: T. Takeuchi;T. Miyazaki;Masahiko Watanabe;H. Mori;K. Sakimura;M. Mishina

Autoantibodies and cell-mediated Autoimmunity to NMDA-type GluRε2 in patients with Rasmussen's encephalitis and chronic progressive epilepsia partialis continua

• DOI: 10.1111/j.1528-1167.2005.01024.x
• 发表时间: 2005-01-01
• 期刊: EPILEPSIA
• 影响因子: 5.6
• 作者: Takahashi, Y;Mori, T;Fujiwara, T
• 通讯作者: Fujiwara, T

NMDA receptors play important roles in acquisition and expression of the eyeblink conditioned response in glutamate receptor subunit δ2 mutant mice.

NMDA 受体在谷氨酸受体亚基 δ2 突变小鼠眨眼条件反应的获得和表达中发挥重要作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Neuroscience 135
• 作者: Kato Y;Takatsuki K;Kawahara S;Fukunaga S;Mori H;Mishina M;Kirino Y.
• 通讯作者: Kirino Y.