アストロサイト特異的遺伝子操作マウスの作製と脳機能解析
星形胶质细胞特异性基因工程小鼠的创建及脑功能分析
基本信息
- 批准号:16047210
- 负责人:
- 金额:$ 4.29万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:2004
- 资助国家:日本
- 起止时间:2004 至 2005
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究は、脳のアストロサイト特異的かつ時期特異的遺伝子操作マウスを作成し、NMDA型グルタミン酸受容体の内在性リガンドと考えられているアストロサイト由来D-セリンによる神経伝達調節と脳機能における役割を、個体レベルで検証することを目的としている。この目的のために、アストロサイト特異的に発現しD-セリンの合成を担うセリンラセミ化酵素(SR)遺伝子を脳部位特異的かつ時期特異的に欠損させたマウスの作製を行った。まず、マウスSRゲノム遺伝子を含むバクテリア人工染色体(BAC)ベクターをバイオリソースより入手し、大腸菌内での相同遺伝子組換え法を改良、確立することにより、SRのタンパク質コード開始メチオニンに合わせ、薬剤投与により活性誘導が可能な遺伝子組換え酵素CrePR遺伝子を挿入した標的遺伝子組換えベクター(SRCP)を作製した。また、同じBACを用いて、SRの酵素機能に必須の領域をコードする第3エクソンの上流と下流のイントロン中にCrePRの認識配列であるloxPを導入し、かつ遺伝子欠損をモニターするためにloxP間の欠損により蛍光蛋白質EGFPを発現するようにした標的遺伝子組換えベクター(SRL)を構築した。これらのベクターをC57BL/6マウス系統由来ES細胞に導入し、標的遺伝子組換え細胞を取得し、次いでES細胞由来のキメラマウスを得た。SRCP系統では生殖系列伝達を確認しマウス系統が完成した。今後両系統のマウスを確立し、掛け合わせることにより、SRの脳機能における役割を分子生物学的、生理学的および行動学的観点から解析する予定である。
は, this study 脳 の ア ス ト ロ サ イ ト specific か つ period specific heritage 伝 sub operations マ ウ ス を make し, NMDA receptor グ ル タ ミ ン acid by let body の internality リ ガ ン ド と exam え ら れ て い る ア ス ト ロ サ イ ト origin D - セ リ ン に よ る god 経 伝 of regulating と 脳 function に お け cut を る service, individual レ ベ ル で 検 card す る こ と を purpose と し て Youdaoplaceholder0 る. こ の purpose の た め に, ア ス ト ロ サ イ ト specific に 発 now し D - セ リ ン の synthetic を bear う セ リ ン ラ セ ミ phenoloxidase (SR) heritage 伝 son を 脳 site specific か つ period specific に owe loss さ せ た マ ウ ス の cropping を line っ た. ま ず, マ ウ ス SR ゲ ノ ム posthumous son 伝 を containing む バ ク テ リ ア artificial chromosomes (BAC) ベ ク タ ー を バ イ オ リ ソ ー ス よ り of し, coliform で の same heritage 伝 subgroups in を え method improvement, establish す る こ と に よ り, SR の タ ン パ ク qualitative コ ー ド began メ チ オ ニ ン に close わ せ, 薬 tonic cast with に よ induced が り activity may be な 伝 son Group in え enzyme CrePR heritage 伝 son を scions into し た mark heritage 伝 subgroups in え ベ ク タ ー (SRCP) を cropping し た. ま た, with じ BAC を い て, SR の enzyme function must に の field を コ ー ド す る 3 エ ク ソ ン の upper と obscene の イ ン ト ロ ン in に CrePR の meet with column で あ る loxP を import し, か つ heritage 伝 son owe loss を モ ニ タ ー す る た め に loxP の owe loss between に よ り 蛍 light protein EGFP を 発 now す る よ う に し The 伝 subgroup of the た target is replaced with えベ タ タ を (SRL)を to construct た た. こ れ ら の ベ ク タ ー を C57BL / 6 マ ウ ス legacy system origin に import し ES cells, mark 伝 subgroups in え cells を し, time い で ES cell origin の キ メ ラ マ ウ ス を た. The SRCP system で で reproductive series 伝 reaches を confirmation た ウス ウス system が completes た た. Struck in future system の マ ウ ス を establish し, hang け わ せ る こ と に よ り, SR の 脳 function に お け る "cutting を molecular biology, physiology お よ び action learning 観 point か ら parsing す る designated で あ る.
项目成果
期刊论文数量(18)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
情動学習の神経機構
情绪学习的神经机制
- DOI:
- 发表时间:2006
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Ando;K.;Nagano;T.;Nakamura;A.;Konno;D.;Yagi;H.;Sato;M;森 寿
- 通讯作者:森 寿
グルタミン酸受容体チャンネルの構造と機能
谷氨酸受体通道的结构和功能
- DOI:
- 发表时间:2005
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Kato Y;Takatsuki K;Kawahara S;Fukunaga S;Mori H;Mishina M;Kirino Y.;Takahashi Y.Mori H.Mishina M.Watanabe M.Konondo N.Shimomura J.Kubota Y.Matsuda K.Fukushima K.Shiroma N.Akasaka N.Nishida H.Imamura A.Watanabe H.Sugiyama N.Ikezawa M.Fujiwara T.;Takeuchi T.Miyazaki T.Watanabe M.Mori H.Sakimura K.Mishina M.;森 寿
- 通讯作者:森 寿
Behavioral adaptations to addictive drugs in mice lacking the NMDA receptor ε1 subunit.
缺乏 NMDA 受体 ε1 亚基的小鼠对成瘾药物的行为适应。
- DOI:
- 发表时间:2004
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Miyamoto;Y.;et al.
- 通讯作者:et al.
Direct interaction of GluRδ2 with Shank scaffold proteins in cerebellar Purkinie cells.
GluRδ2 与小脑 Purkinie 细胞中 Shank 支架蛋白的直接相互作用。
- DOI:
- 发表时间:2004
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Uemura T.;Mori H.;Mishina M.
- 通讯作者:Mishina M.
The NMDA receptor GluRε2 is important for delay and trace eyeblink conditioning in mice.
NMDA 受体 GluRε2 对于小鼠的延迟和微量眨眼调节非常重要。
- DOI:
- 发表时间:2004
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Takehara;K.;et al.
- 通讯作者:et al.
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- 影响因子:0
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Ziskin J L;Nishiyama A;Rubio M;Fukaya M;Bergles DE;森 寿 - 通讯作者:
森 寿
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SRF 共激活因子 MKL2 的功能分析(包括新型异构体 SOLOIST)
- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
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- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
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麓 勝己
化学療法の領域 組成解析(真菌)
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- DOI:
- 发表时间:
2017 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
田邉 広樹;石橋 悠太;庄司 しずく;久保 友喜美;袴田 知之;田中 拓郎;森 寿;和泉 宏謙;崎村 健司;福地 守;津田 正明;田渕 明子;高橋弘喜 - 通讯作者:
高橋弘喜
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